程清波，杨艳萍，王滢，程文涛，张晋芬，张小莉

    1.应城市人民医院，湖北 应城 432400；2.武汉科技大学附属医院，湖北 武汉 430000

    肝癌是临床常见的恶性肿瘤疾病，在我国的死亡率高居恶性肿瘤第二位，而每年新发病例数量占全球50%以上，且发病率呈逐年上升趋势，已成为我国重大公共健康问题[1-2]。随着医疗技术的发展，手术、放化疗、靶点治疗等手段不断提高，肝癌得到一定程度的控制，但总体疗效仍不理想[3]。近年来，中医药在肿瘤治疗中的应用受到越来越多的重视。中医认为，肿瘤属于“积聚”的范畴，《难经》中记载：“肝之积为肥气，在左胁下，如覆杯”[4]，其中肝积、肥气等描述与肝癌相似。山慈菇是兰科植物杜鹃兰和独蒜兰的假球茎，具有清热解毒、消痈散结之功效[5-6]。研究显示，山慈菇在乳腺癌、肝癌、胃癌等癌症中表现出抗肿瘤作用，可明显抑制新生毛细血管的生成[7-9]。现今山慈菇与肝癌的研究大多集中于杜鹃兰的单体成分，而有关含药血清的药理研究较少。基于此，本研究考察山慈菇含药血清(Pseudobulbus Cremastrae seu Pleiones pharmaceutic serum，PCPS)对肝癌细胞HepG2生长运动、凋亡及间质转化的影响，为山慈菇对肝癌的临床治疗提供实验基础。

    1 材料

    1.1 实验细胞与动物动物：40只健康SD大鼠，雌性，2月龄，体质量180～220 g，购自中国医学科学院医学实验动物研究所，许可证号：SYXK(京)2019-0030。大鼠正常摄食饮水，12 h/12 h昼夜交替，室内温度22～25℃，湿度40～60%。

    细胞：人肝癌细胞HepG2(上海恒斐生物科技有限公司，货号：SCC-110211)。

    1.2 药物与试剂山慈菇购自亿弘堂药业有限公司。Annexin V-FITC/PI双染试剂盒(弗元生物科技有限公司，货号：FY600016-20T)；二甲基亚砜(上海联硕生物科技有限公司，货号：0231)；细胞计数试剂盒8(cell counting kit 8，CCK8)、EdU细胞增殖检测试剂盒(上海碧云天生物，货号：C0071S、C0038)；细胞固定液、甘氨酸(浙江联硕生物科技有限公司，货号：E703-1L、0167)；戊巴比妥钠、渗透剂(化源网，货号：57-33-0、1639-66-3)；上皮钙黏素(E-cadherin)抗体、波形蛋白(Vimentin)抗体、p27抗体、Survivin抗体、神经钙黏素(N-cadherin)抗体和GAPDH抗体(圣克鲁斯生物技术公司 ......