许朋俐，刘田田

    1.河南中医药大学，河南 郑州 450046； 2.呼吸疾病中医药防治省部共建协同创新中心，河南 郑州 450046； 3.河南省中医药防治呼吸病重点实验室，河南 郑州 450046

    特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis，IPF)是慢性纤维化性间质性肺炎的一种特殊类型[1]，中医将其归于“肺痹”“肺痿”的病症范畴[2]。李建生教授将其病机概括为“正虚络痹积损”[3]，并据多年临床经验拟定了金水缓纤方(ZL.201610877761.4)[4]。课题组在金水缓纤方的基础上，通过系统药理学结合体内外实验验证筛选出成分清楚、与原方疗效相当的金水缓纤组分方Ⅰ(ZL.201811415482.1)，并进一步通过实验配比优化筛选出了疗效明显、组分明确的金水缓纤组分方Ⅱ(effective-component compatibility of Jinshui Huanxian formula Ⅱ，ECC-JHF Ⅱ)，即淫羊藿苷、川陈皮素、贝母素甲、芍药苷、异甘草素(比例为10026.256.258)[5]。

    特发性肺纤维化发病机制复杂，上皮间质转化(epithelial to mesenchymal transition，EMT)是其发生发展的重要病理机制之一[6]。课题组前期动物实验和细胞实验研究表明，金水缓纤方及其组分方能有效改善肺纤维化，缓解上皮间质转化[7-8]。锌指转录因子1(snail family zinc finger 1,Snai1)作为EMT的“主转录因子”，能通过抑制E-钙粘蛋白(E-cadherin)等上皮细胞标志蛋白的表达，激活N-钙粘蛋白(N-cadherin)等间充质细胞标志蛋白的表达，促进EMT的发生[9]。组蛋白赖氨酸N端甲基转移酶SET结构域分支型1(SET domain，bifurcated 1，SETDB1)，也称为ESET或KMT1E，是一种对组蛋白H3第9位赖氨酸甲基化修饰的特异性甲基转移酶，参与常染色质基因的转录沉默。在一项乳腺癌的研究中发现，SETDB1通过对组蛋白的甲基化修饰，打破组蛋白甲基化和乙酰化的平衡，抑制Snail1基因表达[10]。基于此，本研究在细胞水平探讨金水缓纤组分方Ⅱ调控SETDB1及Snai1对EMT的表观抑制作用。

    1 材料

    1.1 细胞人非小细胞肺癌细胞(A549，细胞目录号：TCHu150)，购自中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库。

    1.2 药物与试剂川陈皮素(nobiletin ......