王秀萍，叶太生，艾望，周珍，张莹雯

    1.武汉大学中南医院，湖北 武汉 430071；2.武汉大学，湖北 武汉 430000

    乳腺癌是威胁女性健康最常见的恶性疾病之一，近几年在我国的发病率快速上升，每年新发患者数居全球第一[1]。据世界卫生组织(world health organizatio，WHO)统计，全球每年约有140万名新发乳腺癌患者[2]。中医认为，恶性肿瘤的发生与正气不足、癌毒邪气趁虚入侵密切相关。导师张莹雯教授长期从事恶性肿瘤的临床基础研究，依据其多年的临床经验，总结出治疗乳腺癌的经验方复方开口箭合剂，临床使用效果良好。雷帕霉素靶蛋白 (mammalian target of rapamycin，mTOR)是一种丝/苏氨酸蛋白激酶，在乳腺癌的发生、发展、转移及耐药等多方面均发挥重要的调控作用。本研究拟考察复方开口箭合剂体内抑制乳腺癌增殖、转移作用及其对mTOR表达的影响，进一步探讨其抑制乳腺癌增殖转移的作用机制。

    1 材料

    1.1 动物及细胞株6周龄SPF级雌性BALB/C小鼠，体质量(20±2) g，购自北京维通利华实验动物技术有限公司，许可证号：SCXK(京)2016-0006。小鼠饲养于武汉大学中南医院SPF级动物实验中心，环境温度20～26 ℃，湿度60%～70%，光照 12 h。4T1高转移小鼠乳腺癌细胞株(简称：4T1细胞株)，由武汉大学肿瘤病理实验中心赠送。

    1.2 药物与试剂开口箭、茯苓、黄芪、伸筋草、丝瓜络、昆布、浙贝母、白花蛇舌草、三棱、水蛭、郁金、夏枯草、莪术、红藤、蒲公英、皂角刺(武汉大学中南医院草药房)；依维莫司(美国MCE公司，货号：HY-10218)。Trizol试剂(美国ambion公司，货号：15596026)；SYBR Green PCR试剂盒(美国KAPA Biosystems公司，货号：KM4101)；逆转录试剂盒(大连TAKARA 公司，货号：639505)；DNase I(加拿大Fermentas公司，货号：EN0521)；DEPC处理水(武汉华联科生物技术有限公司，货号：PAB180005)；氯仿、异丙醇、无水乙醇(国药集团化学试剂有限公司 ......