范修琦，高稳东，陈玉龙，韩懿存，孟伟，樊李妍，高启龙

    1.郑州大学附属肿瘤医院，河南 郑州 450008； 2.河南中医药大学，河南 郑州 450046

    肺癌是当今世界上最常见的恶性肿瘤之一，2020年全球肺癌发生率和死亡率分别占全部恶性肿瘤的11.4%和18.0%[1]。随着免疫疗法的发展，肺癌的治疗手段已经非常多样化，但其死亡率仍然很高。因此，探究肺癌的发生机制，寻求新的治疗靶点，对于肺癌的治疗非常重要。铁死亡(ferroptosis)是近年发现的一种铁离子依赖性的非凋亡性细胞死亡形式，主要由细胞中脂质过氧化物(lipid reactive oxygen species，lipid ROS)积累引起[2]。铁死亡作为非凋亡性细胞死亡形式，已逐渐成为清除抵抗凋亡肿瘤细胞的新策略。肿瘤细胞的生长和分裂需要大量能量，而产能过程中伴随着氧化应激和活性氧的积累，此外，肿瘤细胞中存在着应对氧化应激的基因突变，赋予肿瘤细胞生长优势，使其对铁死亡的抵抗力增强[3]。

    中医药在癌症的辅助治疗中发挥着重要作用，铁死亡这一新型的死亡方式为中医药抗肿瘤的研究提供了新的靶点。麦冬是一味传统中药，归心、肺、胃经，具有养阴润肺、益胃生津、清心除烦的功效。多项研究证实，麦冬及其有效成分可通过促进细胞自噬、凋亡，抑制肿瘤细胞侵袭、迁移等途径发挥抗肿瘤作用[4-5]。此外，麦冬皂苷D(ophiopogonin D，OP-D)能通过调节脂肪酸代谢对抗心肌细胞氧化作用[6]，并能通过干预内质网应激和铁死亡途径降低麦冬皂苷D′的心脏毒性[7]。本课题组前期通过水煎提取、醇浸提取、水提醇沉等多种提取工艺提取麦冬的有效成分，发现麦冬水提物及水提醇沉物对A549细胞没有明显的细胞毒作用，而麦冬乙醇提取物能抑制A549细胞活性，具有明显的细胞毒性。研究发现，麦冬水提及水提醇沉法所得到的多糖成分居多[8]，而经醇提所得的化合物则以皂苷类为主[9]。麦冬乙醇提取物能抑制A549细胞活性，但具体分子机制并不明确，对于其是否能调控细胞铁死亡尚未有研究。本文将通过考察麦冬乙醇提取物对A549细胞的毒性作用，研究其抑制A549细胞活性与铁死亡的关系，进一步探讨麦冬乙醇提取物抗肿瘤的分子机制。

    1 材料

    1.1 细胞人肺腺癌A549细胞株由河南中医药大学方证信号转导实验室馈赠。

    1.2 药物与试剂麦冬[中国北京同仁堂(集团)有限公司，批号：20101004]。无水乙醇(分析纯，天津科密欧化学试剂有限公司，批号：21061223)；DMEM高糖培养基、PBS缓冲液(pH7.2～7.4)、胰蛋白酶-EDTA消化液、MTT、二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide ......