张晓雨,孙光军,鲍新坤,肖文洁,潘姣,林爱珍

    1.湖北省中医院,湖北 武汉 430061; 2.湖北中医药大学,湖北 武汉 430060

    便秘因病程缠绵、证候复杂、波及脏腑较多、治疗缺乏统一标准而被列为难治性疾病,全球患病率约为16%[1]。目前便秘的临床管理主要依靠对症治疗,如润湿剂和各种泻药的使用。然而,由于药物的不良反应和难治性,这些治疗方法常常疗效局限。基于中医理论指导下的中药施治在慢性疾病的防治上具有独特优势。湖北省中医院肛肠科林爱珍教授认为便秘病程缠绵反复,患者长期服用攻下之药,致使津伤更甚,且攻下药多为苦寒败胃之品,使脾运化无力;且久病必虚,气虚则胃肠传导无力,阳虚则胃肠失于温煦,导致排便时间加长。林爱珍教授经过严格的辨证论治及多年的临床实践,在济川煎与补中益气汤的基础上化裁,凝练出行之有效的临证经验方——益肠通秘汤,此方具有温阳益气、润肠通便的功效,越来越多的循证医学证据表明益肠通秘汤在治疗阳虚型便秘中效如桴鼓[2-4],但关于益肠通秘汤治疗便秘的具体分子作用机制尚未见报道。

    代谢组学主要用于研究影响宿主代谢及其生化功能的小分子代谢物,这些化合物在微生物选择和代谢信号通路的构建中起着关键作用[5]。相关研究显示,便秘的发生与多种代谢途径的紊乱密切相关[6]。因此,本研究应用超高液相色谱(ultra-high performance liquid chromatography,UPLC)-质谱(mass spectrum,MS)技术对各组小鼠血清进行非靶向代谢组学分析,通过分析便秘相关代谢产物探讨益肠通秘汤干预便秘的代谢途径和可能机制。

    1 材料

    1.1 动物48只SPF级雄性BALB/c小鼠(6周龄)购自湖北省疾病预防控制中心(动物合格证号:SYXK2020-0002),恒温(23±2) ℃、恒湿、12 h/12 h 明暗循环饲养。本研究经湖北中医药大学伦理实验委员会审批通过(伦理号:20190001-DS-20220520-001),所有动物实验程序参照并符合《国家实验动物使用法》。

    1.2 药物与试剂洛派丁胺、活性炭(上海阿拉丁生化科技股份有限公司,货号:HY-B0418A、A304261);乙腈(色谱级,德国Merk公司,货号:MFCD00001878);甲酸(色谱级,美国ACS公司,货号:R003652);色胺(美国Sigma-Aldrich公司,货号:193747);其他化学试剂均为分析级或色谱级;苏木素伊红染色试剂盒(上海碧云天生物技术公司,货号:C0105S);RNA提取液(美国Ambion公司,货号:15596-026);cDNA合成试剂盒(日本Takara公司,货号:A4202-1) ......