何威华,邓兰,蒋益兰

    1.武汉市中医医院,湖北 武汉 430050; 2.湖南中医药大学,湖南 长沙 410208; 3.江西中医药大学附属医院,江西 南昌 330006; 4.湖南省中医药研究院附属医院,湖南 长沙 410006

    研究显示,结直肠癌2020年新增病例占全球新增癌症病例的10%[1],肝转移是其主要死因[2]。因此,积极探索结直肠癌的肝转移机制,并采取有效的防治措施以提高结直肠癌患者的生存期具有重要意义。1993年,Ioannides和Whiteside正式提出“肿瘤微环境”的概念[3],它是由各种细胞(肿瘤细胞、基质细胞、内皮细胞、免疫细胞)、细胞因子(炎症因子、趋化因子和血管生成因子)、相关信号分子等共同构成的局部内环境,具有低氧、低pH值、间质高压、生长因子和蛋白水解酶产生、炎症反应以及免疫抑制等生物学特征,为肿瘤细胞的增殖、侵袭、转移等恶性生物学行为提供了“肥沃土壤”[4-5]。研究表明,肿瘤细胞之所以能在特定的器官发生或转移,肿瘤微环境起着至关重要的作用[6]。肿瘤微环境中存在与结直肠癌肝转移密切相关的因子,包括趋化因子受体 4(chemokine receptor 4,CXCR4)、转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)、整合素αv β5(integrin αv β5,ITG αv β5)、血清钙结合蛋白 A4(calcium-binding protein A4,S100A4)、血清钙结合蛋白 A8(calcium-binding protein A8,S100A8)、血清钙结合蛋白 A9(calcium-binding protein A9,S100A9)等。

    健脾消癌方是湖南省名中医蒋益兰主任医师的经验方,既往临床研究显示,健脾消癌方能够降低结直肠癌患者术后复发率、转移率,延长其无病生存期及总生存期[7-8]。实验研究发现,健脾消癌方可降低结直肠癌裸鼠模型的肝转移率[9],但其具体机制尚未完全阐明。本实验拟探索健脾消癌方对结肠癌HCT116细胞增殖、侵袭及转移的影响及对肿瘤微环境中肿瘤转移相关因子(CXCR4、TGF-β、ITG αv β5、S100A4、S100A8、S100A9)表达的影响,为健脾消癌方治疗结肠癌的临床应用提供循证依据。

    1 材料

    1.1 细胞与动物人结肠癌HCT116细胞株购自广州吉妮欧生物科技有限公司,编号JNO-373,传至第4代进行后续研究。SPF级SD大鼠14只,体质量(20±2) g,雄性,购自三峡大学实验动物中心,合格证号:SCXK(鄂)2017-0012 ......