李海峰,都修波

    1.河南中医药大学儿科医学院,河南 郑州 450000; 2.河南中医药大学第一附属医院,河南 郑州 450000

    抽动障碍(tic disorder,TD)是一种在儿童时期发病的神经精神性疾病,常伴有多动、睡眠障碍、情绪障碍等症状。临床上通常将其分为三种类型,即短暂性抽动障碍(transient tic disorder,TTD)、慢性抽动障碍(chronic tic disorder,CTD)和图雷特综合征(Tourette′s syndrome,TS)[1]。Meta分析结果显示,我国TD患病率为6.1%,男性患病率(5.1%)高于女性(2.4%);TTD、CTD和TS的患病率分别为1.7%、1.2%和0.3%[2]。若未能及时治疗,可能导致病情迁延难愈,抽动症状延至成年,严重危害儿童的身心健康[3]。

    定风止痉散由经典方剂天麻钩藤饮与止痉散化裁而成,在临床应用中效果显著,且具有副作用小、患者依从性高等优点[4-5]。本研究旨在观察定风止痉散对TD模型大鼠纹状体的脑多巴胺神经营养因子(cerebral dopamine neurotrophic factor,CDNF)、多巴胺D1受体(dopamine D1 receptor,DRD1)、多巴胺D2受体(dopamine D2 receptor,DRD2)、多巴胺转运体(dopamine transporter,DAT)、多巴胺(dopamine,DA)及高香草酸(homovanillic acid,HVA)的影响,以探讨定风止痉散治疗TD的作用机制。

    1 材料

    1.1 动物SPF级雄性Wistar大鼠36只,4周龄,体质量190～218 g,购自济南朋悦实验动物繁育有限公司,许可证号:SYXK(鲁)20190003。动物饲养于河南省中医药研究院动物房,室温20～24 ℃,昼夜12 h/12 h光暗循环,自由进食和饮水,定时通风换气,严格遵循实验动物伦理学相关规定。本实验由河南省中医药研究院伦理委员会审核批准,伦理批号:HNTCMDW-20210115。

    1.2 药物与试剂定风止痉散(天麻、钩藤、石决明、杜仲、川牛膝、桑寄生、黄芩、栀子、夜交藤、益母草、茯神、全蝎、蜈蚣,江阴天江药业有限公司生产,由河南中医药大学第一附属医院颗粒剂药房制备颗粒剂,生产批号:20190622);硫必利(规格100 mg/片,天津中新药业集团股份有限公司,批号:国药准字H12021228);亚氨基二丙腈(iminodipropionitrile,IDPN)、甲酸铵(美国Sigma公司,货号:02716CTV、516961);CDNF抗体、DRD1抗体、DAT抗体(美国Abcam,货号:ab253238、ab279713、ab184451);DRD2抗体(武汉三鹰生物技术有限公司,货号:55084-1-AP);GAPDH抗体(杭州贤至生物科技有限公司,货号:AB-P-R001);甲醇、乙腈(美国Fisher Chemical,货号:A452-4、A955-4);甲酸(美国Honeywell,货号:94318);高效RIPA裂解液、BCA蛋白浓度测定试剂盒(北京索莱宝科技有限公司,货号:R0010、PC0020-50T) ......