DAPK在人卵巢癌细胞株的表达以及去甲基化后的影响(2)
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参见附件。
见图2：
图2、5-aza-CdR对OVCAR-3细胞中DAPK
基因甲基化状态的影响
A：对照组；B：5×10-8mol/L组；E：10-5mol/L组；m：甲基化产物(扩增片段为98bp)；u：非甲基化产物(扩增片段为106bp)
由图2可见：未经药物处理的OVCAR-3细胞中DAPK基因与甲基化特异性引物(MP)扩增出相应长度的片段，但非甲基化特异性引物(UMP)未扩增出相应长度的片段，提示DAPK基因启动子区是甲基化的，仅有甲基化的产物；经5×10-8mol/L浓度5-aza-CdR处理后，非甲基化特异性引物(UMP)扩增出相应长度的片段，甲基化特异性引物(MP)也扩增出相应长度的片段，提示甲基化和非甲基化的DNA序列均存在，即甲基化的DAPK基因被部分去甲基化。经10-5 mol/L浓度5-aza-CdR处理后，非甲基化特异性引物(UMP)扩增出相应长度的片段，但甲基化特异性引物(MP)未扩增出相应长度的片段，说明DAPK基因启动子区是非甲基化的，仅有非甲基化的产物。
3.讨论
研究发现DAPK广泛参与包括p53、TNF-α、Fas、IFN-γ、TGF-β[2]等多种细胞凋亡因子介导的细胞凋亡途径，抑制肿瘤形成，被视为肿瘤抑制物。Bai T等[3]研究女性子宫及卵巢癌细胞系时发现，5种卵巢癌细胞系中DAPK表达均减少，其中有2种细胞系中DAPK基因表达明显减少。Collins Y等[4]通过对卵巢癌中DAPK甲基化水平的研究，发现正常个体基因组DNA中DAPK未发生甲基化，经过转化的正常的卵巢上皮细胞株也未发生DAPK的甲基化，2种卵巢癌细胞系DAPK发生了甲基化，30例卵巢癌患者组织样本67%DAPK发生甲基化，外周血有87%发现也存在DAPK的甲基化。
在哺乳动物基因的启动子区域区有40%包含CpG岛 ......
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