宁宫止血胶囊提取工艺研究(二)
摘要：本处方是出自长期从事中医妇科疾病治疗的临床专家，治疗崩漏(功能失调性子宫出血)的专用复方药物。根据本方的功能主治和方中各药味的主要化学成分及其药理作用，提取部分分成两个工艺路线，即醇提工艺路线和水提工艺路线；醇提工艺、水提工艺均通过正交试验考察来确定最佳组合条件。在此，我们对水提工艺进行筛选、优化。
关键词：宁宫止血胶囊；正交试验；白芍苷；HPLC
Abstract ： To optimize extraction process based on the analysis of the prescription and active constituents； On the basis of analyzing the properties of herbal medicine， the technology of extracting was devided into two part. One part was extracted with alcohol， the side was extracted with warter. The optimize extraction process confirmed by orthogonal experimental design.
, http://www.100md.com
Keywords： NGZHX capsule； Orthogonal experiment ； Paeonia albiflora； HPLC
宁宫止血胶囊处方是由女贞子、黄芪、墨旱连、白芍等组成。文献报道，墨旱莲、白芍等有效成分多溶解于水，故采用水煎煮法提取。采用正交试验法进行水提取工艺的考察，以出膏率、芍药苷含量为评判指标，进行综合评价，筛选最佳工艺条件。
1 仪器与试药
1.1 仪器
9FW-320B型粉碎机(丹东市制药机械厂)；KQ2200E型医用超声波清洗机(昆山市超声仪器有限公司)；日本岛津LC-10A系列高效液相色谱仪；BP211D型电子天平(德国赛多利斯股份公司)。
1.2 试药
, 百拇医药
试验药材女贞子、黄芪、墨旱莲、 白芍等均购自安国药材市场，并经河北医科大学药学院生药教研室聂凤禔教授鉴定。乙醇、甲醇、正丁醇等试剂均为为分析纯；
2 方法
2.1 工艺选择依据
根据本方的功能主治和方中各味药的主要化学成分及其药理作用，确定了方中各药味的提取方法：
2.2 药材前处理
取方中药材，净选，分别处理，按处方量称量。
2.3 水提工艺研究
墨旱莲在临床上用煎汤或捣汁后服用，其主要成分为皂苷、烟碱、等，在水中有一定的溶解度；白芍主要成分为芍药苷，文献报道，用水提取芍药苷，效果优于用甲醇、乙醇及丙酮等提取；当归、茜草、海螵蛸、甘草等所含有效成分大多溶于水；因此，墨旱莲、白芍、当归、茜草、海螵蛸、甘草采用正交试验法水煎煮提取。
, http://www.100md.com
2.4 正交试验设计
根据预实验和参考文献，(A)加水量、(B)煎煮时间、(C)煎煮次数为影响水溶性成分提取工艺的主要因素，各取3个水平，按L9(34)表进行正交试验，以出膏率、芍药苷含量为评判指标，进行综合评价，筛选最佳工艺条件。因素水平设计表见表1.
2.4.1 出膏率的测定 照处方比例，将醇提药渣与其余墨旱莲、白芍等共318g，按L9(34)正交表，加适量水煎煮适当时间、次数，过滤，合并滤液，减压浓缩并定容至500ml，精密量取上清液25 ml，分别置已恒重的蒸发皿中，置水浴上蒸干，于105℃干燥3小时，置干燥器中冷却，迅速精密稳定重量，计算出膏率。剩余药液置真空干燥器中干燥至干膏，测定芍药苷含量。正交试验安排及测定结果见表2，方差分析见表3。
2.4.2 芍药苷的含量测定 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-乙腈-5mmol/L KH2PO4溶液-冰乙酸(14：11：75：0.1)为流动相，流速为1.0ml/min；检测波长：230nm。测定结果见表2，方差分析见表3。
, 百拇医药
出膏率可作选择剂型的参考指标，但与疗效强度不成量效关系，综合评价时权重系数小，以0.2为宜，芍药苷含量以0.8为宜。
出膏率评分=出膏率/最大出膏率×0.2×100
芍药苷评分=芍药苷含量/最大芍药苷含量×0.8×100
3 结果分析
由表2、表3可知，影响水提工艺的主要因素为B因素(煎煮时间)，C因素(煎煮次数)、A因素(加水量)对提取工艺的影响不显著。考虑到大生产实际情况，确定三因素的最佳组合条件为A2B2C2。即：加10倍量水，煎煮2次，每次1.5小时。
参考文献：
[1] 郑虎占等主编《中药现代研究应用》学苑出版社 第2卷P1807～1848
, 百拇医药
[2] 郑虎占等主编《中药现代研究应用》学苑出版社 第2卷P1848～1504
[3] 郑虎占等主编《中药现代研究应用》学苑出版社 第2卷P1256～1304
[4] 郑虎占等主编《中药现代研究应用》学苑出版社 第4卷P3886～3932
[5] 郑虎占等主编《中药现代研究应用》学苑出版社 第4卷P3063～3069
[6] 郑虎占等主编《中药现代研究应用》学苑出版社 第1卷P195～254
[7] 郑虎占等主编《中药现代研究应用》学苑出版社 第1卷P724～744
[8] 郑虎占等主编《中药现代研究应用》学苑出版社 第5卷P4152～4654
, 百拇医药
[9] 郑虎占等主编《中药现代研究应用》学苑出版社 第5卷P4995～500.
[10] 谢秀琼主编《中药新制剂开发与应用》人民卫生出版社 第二版P132
[11] 周勤文，孙晓芳 正交试验优选舒冠胶囊提取工艺 《时珍国医国药》2000；11(10)：883～884
[12] 何勤，张志英，朱洪，张榕 养血止痉胶囊提取工艺的研究《成都中医药大学学报》2002，3；25(1)：48～49
[13] 章崇仪，曹解宁 白芍中芍药苷提取的溶剂比较《中成药》1994，11；16(11)：6～7
[14] 潭晓，李红等 延寿灵液制备工艺与疗效观察《广西中医学院学报》2002，12；17(4)：70～72
[15] 汤明辉，寇俊萍，朱丹妮等 正交设计—重复试验法优选当归芍药散的提取工艺《中国中药杂志》2000，11；11(25)：668～671
[16] 甘恕潮，李成网 正交试验法提取白芍中芍药苷的工艺研究《淮海医药》2001，8；19(4)：344～345
[17] 吴伟康，奉建芳 干草提取工艺的初步研究《中草药》2001；3(32)：210～212
[18] 周莉玲，刘中秋，廖惠芳 参芪补血胶囊的提取工艺研究《中成药》1997；7(19)：1～4, 百拇医药(张红霞 李彩霞 冯梅梅)
关键词：宁宫止血胶囊；正交试验；白芍苷；HPLC
Abstract ： To optimize extraction process based on the analysis of the prescription and active constituents； On the basis of analyzing the properties of herbal medicine， the technology of extracting was devided into two part. One part was extracted with alcohol， the side was extracted with warter. The optimize extraction process confirmed by orthogonal experimental design.
, http://www.100md.com
Keywords： NGZHX capsule； Orthogonal experiment ； Paeonia albiflora； HPLC
宁宫止血胶囊处方是由女贞子、黄芪、墨旱连、白芍等组成。文献报道，墨旱莲、白芍等有效成分多溶解于水，故采用水煎煮法提取。采用正交试验法进行水提取工艺的考察，以出膏率、芍药苷含量为评判指标，进行综合评价，筛选最佳工艺条件。
1 仪器与试药
1.1 仪器
9FW-320B型粉碎机(丹东市制药机械厂)；KQ2200E型医用超声波清洗机(昆山市超声仪器有限公司)；日本岛津LC-10A系列高效液相色谱仪；BP211D型电子天平(德国赛多利斯股份公司)。
1.2 试药
, 百拇医药
试验药材女贞子、黄芪、墨旱莲、 白芍等均购自安国药材市场，并经河北医科大学药学院生药教研室聂凤禔教授鉴定。乙醇、甲醇、正丁醇等试剂均为为分析纯；
2 方法
2.1 工艺选择依据
根据本方的功能主治和方中各味药的主要化学成分及其药理作用，确定了方中各药味的提取方法：
2.2 药材前处理
取方中药材，净选，分别处理，按处方量称量。
2.3 水提工艺研究
墨旱莲在临床上用煎汤或捣汁后服用，其主要成分为皂苷、烟碱、等，在水中有一定的溶解度；白芍主要成分为芍药苷，文献报道，用水提取芍药苷，效果优于用甲醇、乙醇及丙酮等提取；当归、茜草、海螵蛸、甘草等所含有效成分大多溶于水；因此，墨旱莲、白芍、当归、茜草、海螵蛸、甘草采用正交试验法水煎煮提取。
, http://www.100md.com
2.4 正交试验设计
根据预实验和参考文献，(A)加水量、(B)煎煮时间、(C)煎煮次数为影响水溶性成分提取工艺的主要因素，各取3个水平，按L9(34)表进行正交试验，以出膏率、芍药苷含量为评判指标，进行综合评价，筛选最佳工艺条件。因素水平设计表见表1.
2.4.1 出膏率的测定 照处方比例，将醇提药渣与其余墨旱莲、白芍等共318g，按L9(34)正交表，加适量水煎煮适当时间、次数，过滤，合并滤液，减压浓缩并定容至500ml，精密量取上清液25 ml，分别置已恒重的蒸发皿中，置水浴上蒸干，于105℃干燥3小时，置干燥器中冷却，迅速精密稳定重量，计算出膏率。剩余药液置真空干燥器中干燥至干膏，测定芍药苷含量。正交试验安排及测定结果见表2，方差分析见表3。
2.4.2 芍药苷的含量测定 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-乙腈-5mmol/L KH2PO4溶液-冰乙酸(14：11：75：0.1)为流动相，流速为1.0ml/min；检测波长：230nm。测定结果见表2，方差分析见表3。
, 百拇医药
出膏率可作选择剂型的参考指标，但与疗效强度不成量效关系，综合评价时权重系数小，以0.2为宜，芍药苷含量以0.8为宜。
出膏率评分=出膏率/最大出膏率×0.2×100
芍药苷评分=芍药苷含量/最大芍药苷含量×0.8×100
3 结果分析
由表2、表3可知，影响水提工艺的主要因素为B因素(煎煮时间)，C因素(煎煮次数)、A因素(加水量)对提取工艺的影响不显著。考虑到大生产实际情况，确定三因素的最佳组合条件为A2B2C2。即：加10倍量水，煎煮2次，每次1.5小时。
参考文献：
[1] 郑虎占等主编《中药现代研究应用》学苑出版社 第2卷P1807～1848
, 百拇医药
[2] 郑虎占等主编《中药现代研究应用》学苑出版社 第2卷P1848～1504
[3] 郑虎占等主编《中药现代研究应用》学苑出版社 第2卷P1256～1304
[4] 郑虎占等主编《中药现代研究应用》学苑出版社 第4卷P3886～3932
[5] 郑虎占等主编《中药现代研究应用》学苑出版社 第4卷P3063～3069
[6] 郑虎占等主编《中药现代研究应用》学苑出版社 第1卷P195～254
[7] 郑虎占等主编《中药现代研究应用》学苑出版社 第1卷P724～744
[8] 郑虎占等主编《中药现代研究应用》学苑出版社 第5卷P4152～4654
, 百拇医药
[9] 郑虎占等主编《中药现代研究应用》学苑出版社 第5卷P4995～500.
[10] 谢秀琼主编《中药新制剂开发与应用》人民卫生出版社 第二版P132
[11] 周勤文，孙晓芳 正交试验优选舒冠胶囊提取工艺 《时珍国医国药》2000；11(10)：883～884
[12] 何勤，张志英，朱洪，张榕 养血止痉胶囊提取工艺的研究《成都中医药大学学报》2002，3；25(1)：48～49
[13] 章崇仪，曹解宁 白芍中芍药苷提取的溶剂比较《中成药》1994，11；16(11)：6～7
[14] 潭晓，李红等 延寿灵液制备工艺与疗效观察《广西中医学院学报》2002，12；17(4)：70～72
[15] 汤明辉，寇俊萍，朱丹妮等 正交设计—重复试验法优选当归芍药散的提取工艺《中国中药杂志》2000，11；11(25)：668～671
[16] 甘恕潮，李成网 正交试验法提取白芍中芍药苷的工艺研究《淮海医药》2001，8；19(4)：344～345
[17] 吴伟康，奉建芳 干草提取工艺的初步研究《中草药》2001；3(32)：210～212
[18] 周莉玲，刘中秋，廖惠芳 参芪补血胶囊的提取工艺研究《中成药》1997；7(19)：1～4, 百拇医药(张红霞 李彩霞 冯梅梅)