利拉鲁肽对高脂饮食喂养大鼠血清炎症因子的影响及对大动脉的保护作用(2)
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参见附件。
2 实验方法
2.1 动物分组及饲养、模型的建立
SD大鼠随机分为正常对照组(ND)、促动脉粥样硬化高脂饮食组(HFD)、高脂饮食+低剂量利拉鲁肽干预组(HFD+LLID)，高脂饮食+高剂量利拉鲁肽干预组(HFD+HLID)，每组各15只。每组联合肌肉注射维生素D3 (4×105U/Kg，每周给药一次，连续3周)。HFD+LLID组中利拉鲁肽以50ug/kg皮下注射，HFD+HLID组中利拉鲁肽以200ug/kg皮下注射，每天7：30AM及14：30PM各一次。ND及HFD组以等量生理盐水皮下注射。持续饲养3个月，每月称体重，测空腹血糖。
2.2模型的判定、标本的采集及处理
药物干预3月后予禁食一晚，第二天测体重、空腹血糖。用10%水合氯醛腹腔注射麻醉，予四维彩超检测腹主动脉内中膜厚度情况。心尖处抽血约5ml，分离血清置于-20℃冰箱保存以检测炎症因子指标。分离出腹主动脉，置入10%的甲醛中固定以留作HE染色、免疫组化检测。以腹主动脉四维彩超检测及病理切片结果来判定高脂饮食并发大血管病变模型制备成功与否。
2.3 血生化指标测定
全自动生化分析仪测定空腹血糖及糖化血红蛋白，放射免疫分析法检测空腹胰岛素，计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)：FBG×FINS/22.5。根据2010 年美国糖尿病协会糖尿病指南的标准： HOMA-IR>2.69为有胰岛素抵抗的标准。
2.4 血清炎症因子测定
血清ICAM-1、VCAM-1及hs-CRP检测均采用酶联免疫吸附法(ELISA)，操作严格按说明书进行，简述如下：系列稀释的ICAM-1、VCAM-1及hs-CRP标准品和稀释的待测血清100ul加入96孔酶标板 ......
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