双黄连糖浆抗菌镇咳作用研究(1)
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参见附件(3566KB，3页)。
【摘要】目的：研究双黄连糖浆抗菌、镇咳作用，从药理学角度验证双黄连糖浆的功效。方法观察双黄连糖浆体内体外的抑菌作用；对氨水所致咳嗽模型小鼠的镇咳作用，再通过测定小鼠气管酚红分泌量观察其祛痰作用。结果双黄连糖浆具有明显的体内体外抑菌作用，小鼠咳嗽次数减少及咳嗽潜伏期延长，明显增加小鼠气管酚红分泌量。结论双黄连糖浆具有明显的抗菌作用，具有良好的镇咳、祛痰作用。
【关键词】双黄连糖浆；抗菌试验；镇咳试验
双黄连[1] 糖浆是我院精心筛选双花、黄芩、连翘等制成的糖浆剂。有效成分浸出率高，保持了中药汤剂的特色和疗效。在临床用于治疗上呼吸道感染引起的发热、头痛、口干咽痛、等症状。为从药理学角度验证其功效，为临床合理用药提供科学依据，我们对其进行了抗菌、镇咳药理实验研究。
1材料
1.1实验药物
双黄连糖浆，武警黑龙江省总队医院制剂室自制(武制字(2006)B08017)，批号：081217。按生药计含量为0.4g/m1，用法与用量：口服一次10～20ml，一日二～三次。(本次试验按一次20ml，一日三次计算)。成人(60kg)日治疗量为1.0ml/kg=(20ml×3次)/60kg。给药剂量：按成年动物每公斤体重给双黄连糖浆计算。阳性对照药：双黄连口服液(20ml/支，哈尔滨三精制药厂，批号：0807214)。口服一次1～2支，一日三次。(本次试验按一次2支，一日三次计算)。成人(60kg)日治疗量为1.0ml/kg=(20ml/次×3次)/60kg。按成年动物每公斤体重给双黄连口服液计算。
1.2菌种：标准菌株：金黄色葡萄球菌26003，大肠杆菌44102，由中国药品生物制品检定所分发，黑龙江省药品检验所提供。临床分离株：金黄色葡萄球菌，白色葡萄球菌，大肠杆菌，肺炎克雷伯氏杆菌，肺炎双球菌，乙型溶血性链球菌由哈尔滨医科大学微生物教研室鉴定及提供。
1.3动物：昆明种小鼠，由黑龙江省药品检验所动物室提供。实验动物生产许可证号：SCXK(黑)2006—005。
1.4试剂、仪器：胃膜素：由哈尔滨生化制药一厂提供。营养肉汤培养基，黑龙江省药品检验所提供。千分之一电子天平，日本岛津。紫外可见分光光度计，UV-265日本岛津。
1.5统计学处理：资料数据以x±s表示，计量资料数据用“t”检验。
2方法与结果
2.1体外抑菌作用[2、3]
2.1.1培养基制备：取营养肉汤30g，加蒸馏水1500ml溶解，每试管分装lOml，置高压灭菌锅中0.11Mpa，灭菌20min，即为液体营养肉汤培养基，置冰箱4℃保存备用。
2.1.2受试药制备：取双黄连糖浆lOml；双黄连口服液lOml。两药调PH至7.4，置高压灭菌锅中0.11Mpa，灭菌20min备用。
2.1.3液体培养基菌种制备：以接种环沾取菌种，移于液体培养基内，于37℃恒温培养箱内培养18h，细菌生长良好，用标准细菌浊度计定量测定细菌密度为109个/ml。试验当日，用生理盐水对各种菌作10-3稀释备用。
2.1.4试验步骤：取144支无菌小试管分16组，每组9管，各管放入无菌培养基1ml，在无菌条件下吸待测药液1ml，放入第1管中，混匀，吸出1ml放入第2管中……，如此稀释至第8管，从第8管吸取1ml弃去，以第9管作为空白对照管。除第8管外，各管加0.1ml、10-3待测菌液，混匀，于37℃恒温培养箱内培养18h。以浊度为指标，检查试管中有无细菌生长，以不显示混浊的最高药物稀释度—细菌未生长的那一管药液稀释度，作为该药的最低抑菌浓度(MIC)。结果见表1、2、3。
表1双黄连糖浆抑菌试验结果
稀释度1:21:41:81:161:321:641:12阴对阳对
浓度(mg/ml)25012562.531.215.67.813.91.95-
金葡菌 26003
大肠杆菌 44102
金黄色葡萄球菌
大肠杆菌
白色葡萄球菌
肺炎克雷{白氏杆菌
肺炎双球菌
乙型溶血型链球菌-
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注：“+”为有细菌生长；“-”为无细菌生长。
表2双黄连口服液抑菌试验结果
稀释度1:21:41:81:161:321:641:12阴对阳对
浓度(mg/m1)25012562.531.215.67.813.91.95-
金葡菌 26003
大肠杆菌 44102
金黄色葡萄球菌
大肠杆菌
白色葡萄球菌
肺炎克雷伯氏杆菌
肺炎双球菌
乙型溶血型链球菌-
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