地榆配方颗粒质量标准的研究
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【摘要】目的：建立地榆配方颗粒的质量标准。 方法：增加了地榆的薄层色谱鉴别，以及没食子酸的高效液相色谱法含量测定。结果：薄层色谱鉴别中，在供试品与地榆对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；含量测定中，平均加样回收率为98.4%，RSD＝0.40%(n＝9)；各阴性均无干扰。结论：所建立的方法能很好地对地榆配方颗粒进行质量控制。
【关键词】地榆配方颗粒；地榆；没食子酸；HPLC
地榆，为蔷薇科植物地榆Sanguisorba officinalis L.或长叶地榆Sanguisorba officinalis L. var. longifolia (Bert.) Yü et Li的干燥根，具凉血止血，解毒敛疮等功效，临床上用于便血，痔血，血痢，崩漏，水火烫伤，痈肿疮毒，其质量标准收载于《中国药典》2010年版一部[1]。地榆配方颗粒，为深圳三九医药股份有限公司通过水煎煮工艺提取其有效成分，制成的一种便于医院药剂科配伍、利于患者携带和服用的一种免煎中成药，在国内医院广泛应用。然而，该中成药却缺乏质量标准。因此，为有效地控制该制剂的质量，本文采用薄层色谱法(TLC)和高效液相色谱法(HPLC)对其进行鉴别和含量测定。该方法操作简便、重现性好、专属性强、灵敏度高，结果科学准确，适合作为该品种的质量控制手段。具体研究如下。
1仪器与试药
1.1仪器高效液相色谱仪(生产厂家：美国Agilent公司；型号：Agilent1200系列)，电子天平(Sartorius BP210S)，超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司，250W/40kHz)。
1.2试药地榆配方颗粒(批号：1007221S、1007261S、1007291S，由深圳三九医药股份有限公司生产并提供)；地榆对照药材(批号：121286-200402，购于中检所)；没食子酸对照品(批号为110831-20030，购买于中检所)；硅胶G薄层板(青岛海洋化工集团有限公司)，甲醇为色谱纯(美国Fisher公司)，水为超纯水，其余试剂均为分析纯。
2方法与结果
2.1地榆的定性鉴别取供试品约0.3 g，置回流瓶中，加10%盐酸的50%甲醇溶液25ml，加热回流2小时，放冷，滤过，滤液用盐酸饱和的乙醚振摇提取2次，每次25ml，合并乙醚液，挥干，药渣加甲醇1ml溶解，作为供试品溶液。另取地榆对照药材粉末约2g，同法制得对照药材溶液。再取没食子酸对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。最后再取按处方比例及制法制备的缺地榆的阴性样品(辅料)，按上述制备方法处理，即得阴性对照溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2010版一部附录ⅥB)试验，吸取上述四种溶液各5μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯(用水饱和)-乙酸乙酯-甲酸(6：3：1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1%三氯化铁乙醇溶液。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照无干扰。结果见图1。
注：1. 阴性对照溶液2~4. 地榆配方颗粒供试品溶液5. 地榆对照药材溶液6. 没食子酸对照品溶液
图1地榆配方颗粒的薄层鉴别图
2.2没食子酸的含量测定
2.2.1色谱条件色谱柱：Agilent C18反相柱(5μm×250 mm×4.6 mm)；流动相为甲醇-0.05%磷酸水溶液(5：95)；流速为1.0 mL/min；柱温为35 ℃；检测波长为272 nm；进样量为10 μL。在此条件下，理论塔板数按没食子酸峰计算不得低于2000，没食子酸峰与相邻的其他峰的分离度应大于2.0。阴性对照、没食子酸对照品、地榆配方颗粒样品色谱图见图2。
注：1. 没食子酸
图2阴性对照(A)、没食子酸对照品(B)、地榆配方颗粒(C)的HPLC图谱
2.2.2对照品溶液的制备取没食子酸对照品适量，精密称定，置棕色瓶中，加水制成每1ml含30μg的溶液，即得。
2.2.3供试品溶液的制备取适量本品，研细，取约0.034g，精密称定，置100ml棕色容量瓶中，加入水70ml，再加10%盐酸5 ml超声处理(功率250W，频率40KHz)30分钟，放冷，加水至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
2.2.4精密度试验取同一份供试品溶液(批号：1007221S)，在2.2.1色谱条件下重复进样6次，测定，计算没食子酸峰面积的RSD为0.14%，结果表明，该方法精密度良好。
2.2.5稳定性试验取同一批样品(批号：1007221S)，依法制备后分别在0、2、4、6、8、12、24小时测定没食子酸的含量。结果发现供试品溶液在48小时内稳定(RSD%=1.06%)。
2.2.6重复性试验取同一批样品(批号：1007221S)依法平行制备6份，测定没食子酸的含量。结果没食子酸平均含量为19.78 mg/g(RSD%=0.23%)，表明该方法重复性良好。
2.2.7加样回收率试验取同一批样品(批号：1007221S)9份，按表1要求分别加入适量样品并精密称定，按2.2.1方法制备和2.2.3条件测定。结果表明该方法准确度高(见表1)。
表1 加样回收率试验结果
2.2.8样品测定分别取3批不同批号的地榆配方颗粒，按2.2.1项下的供试品制备方法和2.2.3项下的色谱条件测定没食子酸的含量。结果分别为：19.78mg/g(批号：1007221S)、18.46mg/g(批号：1007261S)和22.49mg/g(批号：1007291S)。
3讨论
3 ......
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