马丽丽 岳 麓 邱文生▲

    (1.青岛大学医学院，山东青岛 266000；2.青岛大学医学院附属医院肿瘤科，山东青岛 266000)

    增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen，PCNA)是一种核蛋白，参与DNA的合成和修复，仅在增殖细胞中表达，较高的PCNA增殖指数(PCNA PI)预示着较高的肿瘤细胞增殖活性。一般认为PCNA PI越高，肿瘤的增殖能力越活跃，其分化程度越低，恶性程度越高，越容易发生浸润和转移[1-3]。AgNOR(silver-binding nucleolar organizer regions)是核仁组成区相关嗜银蛋白，AgNOR颗粒数与细胞增殖活性、DNA倍体水平有关[4]。两者均是反映细胞增殖活性的主要客观指标。为探讨两者的相互关系及其与生物学行为及预后判断的关系，笔者利用PCNA免疫组化研究和AgNOR检测，对比不同分化程度的肝细胞肝癌(HCC)细胞的特点。

    1 材料与方法

    1.1 研究材料

    青岛大学医学院附属医院病理科2000～2007年经病理确诊为肝细胞肝癌患者的手术切除标本67例。标本经10%福尔马林固定，石蜡包埋，连续切片4μm，HE染色。组织分类按WHO分类标准分级，高分化19例，中分化36例，低分化12例。按肿块长径分为<3cm组7例、3～5cm组20例、>5cm组40例。术前未经放化疗治疗，术后随访2年以上，其中术后生存(2年以上)15例，术后短期死亡(半年以内)11例，生存期在半年～2年41例。所有病例标本进行PCNA免疫组化检测和AgNOR检测。

    1.2 研究方法

    PCNA免疫组化检测采用LSAB法，PCNA(Pcl0)及LSAB试剂盒为美国Dako公司产品；免疫组化检测标准：阳性为细胞核呈界限清楚的棕褐色反应。阳性结果记录标准：每张切片随机观察高倍视野5个，每个视野计肿瘤细胞100个，计算增殖指数(PI＝PCNA阳性细胞核数/计测细胞总数)。PCNA PI可分为3级：Ⅰ级(0～25%) ......