林广庆 严鹏科▲ 汪江波 张 慧 段才闻 李世煌

    (1.广州医学院附属第三医院药剂科，广东广州510150；2.广西壮族自治区南溪山医院药剂科，广西桂林541002；3.南华大学药物药理研究所，湖南衡阳421001)

    泡沫细胞是动脉粥样硬化病变的特征性病理细胞，其中巨噬细胞源性的泡沫细胞是动脉粥样硬化病变中最早出现、最主要的泡沫细胞。Andrew等在Nature Medicine上专文指出，巨噬细胞源性的泡沫细胞有可能成为动脉粥样硬化诊断和治疗的靶点[1]。

    SELEX技术是20世纪90年代创立的一种的生物文库技术[2-3]。利用该技术可以从一个大容量的随机寡核苷酸文库中筛选得到与靶物质高特异结合亲和的配基即适配子。它是一个DNA或RNA的寡核苷酸片段，具有靶向靶物质及抑制靶蛋白功能的作用，因此，在基础研究、药物筛选及临床诊断和治疗等方面有着广阔的应用前景。

    笔者利用SELEX技术筛选出了巨噬细胞源性泡沫细胞的36个适配子，本研究就其中的40号适配子命名为PM2对动脉粥样硬化病变组织结合的特异性作了进一步研究，现将研究结果进行报道。

    1 材料与方法

    1.1 实验材料

    THP-1细胞株、内皮细胞株为南华大学心血管研究所所保存；血管平滑肌细胞由SD大鼠胸主动脉平滑肌细胞培养而得；新生牛血清购自杭州四季清生物工程材料有限公司；佛波酯(PMA)为CALBIOCHEM公司产品；低密度脂蛋白(LDL)由北京老年病研究所提供；新西兰白兔：雄性，由湖南农业大学动物科技学院实验动物中心提供，合格证号为scxk(湘)：2003-0003。

    1.2 适配子的合成

    FITC标记的PM2适配子由上海生工生物工程技术服务有限公司合成。

    1.3 细胞培养

    THP-1细胞株培养：用含有10%新生牛血清的RPMI1640培养基于37℃、5% CO2、饱和湿度的CO2培养箱中培养。每2～3天用直接分瓶的方法传代。

    内皮细胞株培养：用含有15%新生牛血清的高糖DMEM培养基于37℃、5% CO2、饱和湿度的CO2培养箱中培养。每2～3天用0.25%胰蛋白酶进行消化传代。

    大鼠血管平滑肌细胞培养：在无菌条件下将体重150～200g、4～8周龄的SD大鼠的胸主动脉段取出，刮除内膜迅速撕下中膜内、中层，切成约1mm宽的小条，种植于培养瓶壁，置于37℃恒温箱，待细胞铺满瓶底后进行细胞传代。

    1.4 泡沫细胞模型的建立 ......