金光春 陈从容 李言君 薛江南 姜 玲 李升钟 金东春

    (1.滨州医学院，山东烟台264003；2.韩国延世大学，首尔120-752；3.延边大学，吉林延吉133000))

    目前，异体牙移植作为一种器官移植，因免疫排斥问题未得到解决，至今仍有许多问题有待探索。近年来，随着器官移植和免疫抑制剂研究的进展，动物实验已取得了成功。随着手术技巧的成熟和围手术期处理等方面的日益完善，异体牙移植已成为多种实质性器官终末期疾病的有效治疗手段。尽管各种新的免疫抑制剂不断问世，但移植后的排斥反应仍无法完全避免[1-3]。如何消除或降低异体牙移植后的免疫排斥反应，提高异体牙移植的成功率，是临床上亟待解决的问题。而且研究报告不尽相同，尚无统一的定论[6]。本研究针对异体牙移植免疫排斥反应，探求新的、安全有效的新型免疫抑制剂，为异体牙移植术在临床上提供基本资料。

    1 对象与方法

    1.1 实验对象与实验组

    经过血液抗原性确认的20只白鼠(4周龄的Sprague-Dawley系)随机分为两组，同种异体移植组和接受组，选择15只雄性白鼠(30颗上颌左右第1磨牙)为异体牙供者，体重16～20g。选择15只雌性白鼠(20颗上颌左右第1磨牙)为移植牙受体者，体重16～18g，分成具有相同抗原性和不同抗原性两类。1组：免疫抑制剂未处理，分别1周、2周、4周、8周时间段采集实验标本。2组：免疫抑制剂(Tregs)处理，分别1周、2周、4周、8周时间段采集实验标本。保存溶液采用F medium。靶细胞采用Sp-20骨髓瘤细胞。

    1.2 生物化学试剂、反应试剂及免疫抑制剂的应用

    [3-(4，5-dimethylthiazol-2-yl)-2.5-diphenylte-trazolium bromede，MTT]

    溴化二苯四偶氮盐，兔补体，蛋白水解酶。反应试剂是采用10% 二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide，DMSO/Sigma Chemical Co.，St.Louis，USA)。术前1天晚和术前20分钟依据实验分组给予免疫抑制剂1次。

    1.3 方法

    1.3.1 牙移植术 采用Ketamine(0.1mL/100gm，Jaeil JaeDang，Korea)药物麻醉后，用探针进行牙周分离，尽量减少对周围组织外伤的情况下，用特制的拔牙钳子拔除异体牙供者的左右上颌第1磨牙，移植于受体者。

    1.3.2 效应细胞的制备 无菌条件下取出同种异体移植组和接受组白鼠脾脏在骨凿器上磨碎 ......