钟健强 郭建军 卢 奎 沈庆煜，

    1.广东省增城市人民医院神经科，广东增城 511300；2.中山大学附属第二医院神经科，广东广州510120

    随着我国人口老龄化趋势的到来，帕金森病这一常见老年神经退行性疾病越来越受到研究者重视。近年来，众多研究报道小胶质细胞(microglia，MG)的激活参与中枢黑质纹状体炎症过程，从而加重帕金森病多巴胺能神经元的变性凋亡过程[1]。通过调控小胶质细胞激活状态而控制其后续的炎症反应成为近年来神经系统退行性疾病的研究热点。小胶质细胞在中枢组织中显示出强大的固有免疫功能，但其后续无控制的神经炎症在很多神经退行性疾病的损伤机制中起着推动作用。同样，MG的激活在帕金森氏病的神经元损伤中也存在类似的毒性效应，从而加重黑质纹状体通路多巴胺神经元变性。米诺环素(minocycline)属于四环素家族的广谱、二代半合成脂溶性抗生素。研究报道，米诺环素能有效抑制LPS刺激的MG激活，从而下调炎症因子TNF-α、IL-1β和NO的表达[2]。笔者设想，米诺环素能通过抑制MG激活引发的炎症反应从而减轻对多巴胺能神经元的损伤。PC12细胞的生物学特性类似于多巴胺能神经元，常作为帕金森病的离体研究模型。本实验拟通过米诺环素对LPS刺激后的小胶质细胞株BV2激活进行干预，进而观察干预BV2细胞对PC12细胞生长、增殖的影响，探讨米诺环素在MG对PC12细胞生长影响中的作用及机制。

    1 材料与方法

    1.1 主要试剂耗材

    细胞培养所需的DMEM-F12培养基、胎牛血清、双抗、胰酶均购于GIBICO公司。LPS(L2880)、米诺环素(M9511)、二甲基亚砜(DMSO)购于美国Sigma公司；酶联免疫吸附法(ELISA)预包被试剂盒小鼠源TNF-α、IL-1检测试剂盒购于深圳达科为生物公司；四甲基偶氮唑盐(MTT)购于MBchem公司。6、96孔transwell共培养板购于corning公司。

    1.2 实验方法

    1.2.1 细胞培养、分组和共培养 多巴胺能神经元细胞系PC12以及小胶质细胞系BV2均购于中国医学科学院基础所细胞中心 ......