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编号:154775
阪崎肠杆菌检测技术研究进展
http://www.100md.com 2011年8月15日 中国医药科学 2011年第17期
糖苷酶,菌落,1传统检测方法的改进,2分离培养基的改进,2分子生物学方法,3其他检测系统
     熊贞兰

    南昌市湾里区疾病预防控制中心,江西南昌330004

    阪崎肠杆菌(enterobacter sakazakii)曾名黄色阴沟肠杆菌,为肠杆菌科肠杆菌属的一个种。1980年Farmer等[1]发现阪崎肠杆菌和阴沟肠杆菌无论是DNA-DNA杂交还是生化反应以及产生色素上都有很大区别,因此建议将其从阴沟肠杆菌中分出来,命名为阪崎肠杆菌。2007年Iversen等[2]通过基因分析认为阪崎肠杆菌与肠杆菌属有较大差异,建议将其单独成立一个新属,并将新属命名为“阪崎克若诺菌”(cronobacter sakazakii)。

    1 传统检测方法的改进

    1.1 传统检测方法

    传统的阪崎肠杆菌鉴定方法一般是先对样品增菌,划线分离获得单菌落,再进行生化鉴定。阪崎肠杆菌的生化反应与阴沟肠杆菌相似,应注意区别。

    Aldova等[3]评估了从捷克斯洛伐克分离的73株阪崎肠杆菌吐温80脂酶的活性,结果显示97.3%的菌株含有该酶。Postupa等[4]研究了从奶粉和婴儿配方粉中分离到的6株阪崎肠杆菌,发现所有的菌株在25℃和37℃培养7 d后都产生吐温80脂酶。因此,该酶也是鉴定阪崎肠杆菌的一个重要指标。

    1.2 分离培养基的改进

    美国FDA推荐使用结晶紫中性红葡萄糖胆盐琼脂(violet red bile glucose agar,VRBGA)分 离 阪 崎 肠 杆 菌,该 菌 在VRBGA平板上生长成黏液状、周边有胆汁酸沉淀的红色菌落。但Famer等[1]发现阪崎肠杆菌在VRBGA上可长成2种菌落,一种是典型的光滑型菌落,容易被接种环移动;另一种是干燥型或黏液状菌落,不容易区分。Muytijens等[5]研究129株阪崎肠杆菌酶谱时发现,129株阪崎肠杆菌都有α-D-葡萄糖苷酶活性,而其它的肠杆菌没有。Farmer等[6]也发现57株阪崎肠杆菌有53株具有α-D-葡萄糖苷酶活性。因此α-D-葡萄糖苷酶可以作为设计阪崎肠杆菌选择培养基的一个工具。

    一种方法是把α-D-葡萄糖苷连接上荧光基团然后添加到培养基中,阪崎肠杆菌分解α-D-葡萄糖苷从而释放出荧光基团,在紫外灯下可以清晰判别。Leuschner等[7]在营养琼脂上加入4甲基伞形基-α-D-葡萄糖苷,制成阪崎肠杆菌荧光选择培养基 ......

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