核酸检测技术在无偿献血者血液筛查中的应用分析
全自动,1材料与方法,1标本来源,2仪器,3试剂,4方法,5确证实验,2结果,1NAT检测情况,2NAT检测阳性标本分项确证情况,3讨论
冯秀梅 王 艳吉林省吉林市红十字中心血站,吉林吉林 132001
近年来,国内已有部分血站使用NAT筛查献血者。根据我国现行的法定要求,采供血机构对献血者病毒血清学检测项目主要为HBsAg、抗-HCV、抗-HIV和抗-TP,ELISA方法检测[1]的筛查模式已极大地降低了输血传播疾病的风险,但因输血而患传染病的情况仍然时有发生[2],主要因为我国属于肝炎的高发区,人群中HBsAg携带率为9.09%,HBV流行率>60%[3], 抗-HCV阳性率也达到了3.2%[4],艾滋病也有快速发展的趋势。现有的血清学方法避免不了对病毒感染“窗口期”的漏检,而近年来发展的高度敏感、特异的核酸扩增技术(NAT)可使HBV、 HCV和 HIV病毒的“窗口期”明显缩短[5],大大提高了输血和血液制品的安全。现将笔者所在血站2010年12月~2011年7月ELISA检测阴性献血者的标本进行NAT检测的情况报道如下。
1 材料与方法
1.1 标本来源
2010年12 月~2011年7月采集的无偿献血者全血标本中,经ELISA方法检测阴性的标本共18 751份,其中男10 230人,女8 521人。采血后用3支5 mL EDTA抗凝真空试管(其中两支带分离胶,1管不带分离胶),保存于2~8℃冰箱,24 h内分离血浆,1管不带分离胶的用于免疫4项、ALT、血型等检测,1管带分离胶的用于NAT检测,另外1管用于标本保存备用。
1.2 仪器
Roche Cobas S201全自动核酸提取、扩增检测系统,Hamilton star全自动混样仪,Cobas Ampilprep核酸提取仪 ......
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