当前位置: 首页 > 期刊 > 《中国医药科学》 > 2012年第22期
编号:13175540
甲磺酸伊马替尼联合塞来昔布对胃肠间质瘤细胞增殖及凋亡的影响(2)
http://www.100md.com 2012年11月15日 吕慧芳 张占东 许春苗 陈小兵 陈贝贝 李宁 罗素霞 花亚伟
第1页


    参见附件。

     1.3?MTT检测细胞生长抑制率

    取对数生长期细胞制备细胞悬液,以1×104个/孔浓度接种细胞至96孔板中,常规培养24 h,分别加入含塞来昔布的PRMI1640培养基,浓度分别为0.1、1、10、100、1 000 μmol/L,同时设阴性对照组和空白组,每个梯度设3个复孔。继续培养72 h后,每孔加入MTT溶液100 μL,4 h后离心,弃去孔中液体,加入DMSO150 μL/孔,10 min后,应用全自动酶标仪,于570 nm波长处测定吸光度(A)值,计算生长抑制率,绘制细胞生长抑制曲线,计算塞来昔布抑制GIST-T1细胞增殖的药物半效抑制浓度(IC50)。

    将处于对数生长期的GIST-T1细胞接种于96孔板中,常规培养24 h,分别加入含塞来昔布(10μmol/L)、甲磺酸伊马替尼(10μmol/L)以及塞来昔布(10μmol/L)联合甲磺酸伊马替尼(10μmol/L)的培养基,继续培养72 h后,每孔加入MTT溶液100 μL,4 h后离心,加入DMSO 150μ /孔,应用全自动酶标仪测定吸光度(A)值,按下述公司计算细胞生长抑制率:生长抑制率=(A对照组-A实验组)/(A对照组-A空白组)×100%。

    1.4?Western blot检测Bax/ Bcl-2蛋白水平表达

    分别收集实验组与对照组细胞提取总蛋白,通过聚丙烯酸胺凝胶电泳分离蛋白样本。将蛋白样本转移至PVDF膜上,蛋白封闭液37℃封闭1 h,PBST洗涤,分别用鼠抗人Bax、Bcl-2单克隆抗体(1︰1 000) 4℃振荡孵育过夜,TBST洗涤3次 ......

您现在查看是摘要介绍页,详见PDF附件
如果您在使用手机等流览时无法查看或下载全文,可能是被搜索引擎失真“转码”,请点击屏幕最下方的“电脑版”或“原网页”访问。


限于服务器压力,网站部分信息只供爱心会员或有一定积分的注册会员流览。
此 pdf全文 需要 5 积分(免费注册登录后每天可以领取10个积分)。
用户名
密 码
  忘了密码

如果您还不是100md.com会员,欢迎 免费注册
如果您想获得积分,点击这里 查看积分规则
如果您想订购杂志,请直接与《中国医药科学》编辑部联系。
    信息仅供参考,不构成任何之建议、推荐或指引。文章版权属于原著作权人,若您认为此文不宜被收录供大家免费阅读,请邮件或电话通知我们,我们收到通知后,会立即将您的作品从本网站删除。

   微信文章  关注百拇  评论几句  搜索更多