1.1 一般资料

    从2012年3月～2014年3月我院收治的结核病患者中选取62例为研究对象，男36例，女26例，年龄18～71岁，平均(45.3±3.2)岁，按随机数字法对患者进行分组，首次诊治患者39例为观察组，首次诊治失败后行第二次治疗患者23例为对照组，全部患者均留取痰标本，经Bactec-960增菌培养与7H9培养基培养，抽取其临床分离株为研究材料，并行耐药检测。两组患者在性别、年龄方面比较差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性，见表1。

    1.2 方法

    1.2.1 仪器与试剂 主要仪器包括：微生物培养箱；生物安全柜；罗氏培养基。药物包括：链霉素(SM)、异烟肼(ING)、乙胺丁醇(EMB)及利福平(RFP)。罗氏培养基作为药敏试验方法。

    1.2.2 检测方法 采用PCR-反向斑点杂交技术对结核分枝杆菌中的rpoB、KatG基因及rpsL基因突变进行检测，并根据结核分枝杆菌野生株序列，设计覆盖rpoB、KatG基因和rpsL基因核心突变区的系列寡核苷酸探针并将其固定在尼龙膜上，并应用生物素标记的特异性引物扩增包含核心突变区的基因片段，与固定在膜上的寡核苷酸探针杂交，对突变位点进行快速检测。从62株临床分离株中挑选36株耐药株进行药敏实验 ......