1.5 DNA Ladder法检测细胞凋亡

    收集细胞，PBS清洗后加入0.8mL的DNAzol(Invitrogen公司产品)，室温放置数分钟，4℃离心15min，将上清移入EP管，加入0.4mL无水乙醇混合，4℃离心10min，弃上清后加入75%乙醇洗2次，待乙醇挥发干净后加入适量TE溶解基因组DNA，取适量DNA在含有EB的1.8%琼脂糖凝胶上电泳3小时，紫外线激发下观察梯形条带，并使用凝胶成像系统采集图像。

    1.6 Westernblot法检测p53和caspase-3的表达

    收集各组细胞，清洗离心后加入裂解液提取蛋白，采用BCA法定量，配胶加样，进行SDS-PAGE电泳，电转蛋白至PVDF膜，采用含5%脱脂奶粉的Tris-HCl缓冲盐溶液(TBST)4℃封闭过夜；p53和caspase-3抗体(均购自Santacruz公司)1∶1000稀释后室温封膜2h，TBST清洗，加入二抗4℃过夜，再次TBST清洗，最后ECL发光，显影，定影，收集图像。

    1.7 统计学分析

    采用SPSS15.0软件进行统计分析 ......