刘 莎 刘俊骞 郑彦茹 宫 蕊 初丽敏 魏树林

    1.石家庄市第三医院，河北石家庄 050011；2.河北医科大学第一医院，河北石家庄 050031；3.石家庄市急救中心，河北石家庄 050000

    间充质干细胞是一种干细胞，主要源自发育早期的中胚层，分布于脐血、脂肪以及骨髓等组织之中，既可以自我更新，也可以高度增殖，还能分化成脂肪细胞、成骨细胞以及神经细胞，这种多项分化潜能使得间充质干细胞成为基因治疗及替代治疗领域中有着极高实用价值的一个细胞来源[1]。然而，现阶段间充质干细胞的来源依然存在争议，原因在于间充质干细胞的经典来源主要为骨髓组织，随着年龄增长间充质干细胞含量与增殖能力也会显著下降[2]。对此，临床尝试将人脐带作为来源，获取免疫源性低且增殖能力强的间充质干细胞。本研究对人脐带间充质干细胞的生物学特性及向神经样细胞分化进行研究。现报道如下。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料

    选取2016年10月～2017年10月期间于本院娩出的正常新生儿，去其羊膜、血管，获取脐带基质，将其剪碎为1.5mm大小的块状留作培养使用。同时，准备产自美国N2培养基与DMEM培养基、胎牛血清与谷氨酰胺、重组碱性成纤维生长因子、重组表皮生长因子、β巯基乙醇、兔康神经微丝抗体、鼠抗β-Ⅲ类微管蛋白抗体、兔抗胶质纤维酸性蛋白抗体，此外还有产自我国的兔抗超蛋白抗体、SABC试剂盒以及产自上海中西药业的丹参注射液，产自日本的RT-PCR试剂盒，产自法国的荧光标记小鼠抗人抗体(CD)。

    1.2 方法

    1.2.1细胞培养 使用重蒸水配置两种培养基的细胞培养基，在过滤消毒之后加入青霉素、链霉素及二性霉素B各100U/mL进行抗菌处理，随后在DMEM培养基中加入10%胎牛血清与重组表皮生长因子、重组碱性成纤维生长因子各5ng/mL与谷氨酰胺，留作备用。将脐带基质块放到配置好的细胞培养液中，于六孔板中培养，经过培养扩增，其呈贴壁生长，待其省占到融合时传代使用含有抗凝剂的0.25%胰蛋白酶 ......