石万萍 李桂香

    兰州大学第二医院伽马刀科，甘肃兰州 730000

    肺癌每年新发病例约70.5万，死亡病例约56.9万[1]。其中，NSCLC占肺癌总人数的80%～85%，大约75%的NSCLC患者在确诊时已为晚期(Ⅲ～Ⅳ期)[2]，错失了最佳手术时机[3]，导致NSCLC的生存率低、死亡率高，因此，肺癌的早期诊断、合理治疗是延长NSCLC生存期，减少死亡率的有效措施之一。本文选取兰州军区兰州总医院2016年3～10月期间经病理证实的NSCLC患者70例，进行端粒长度与NSCLC病理类型、临床分期、吸烟情况、年龄、KI-67等因素的分析比较。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料

    选取兰州军区兰州总医院2016年3～10月期间经气管镜活检或穿刺活检，病理为腺癌、鳞癌、大细胞癌等NSCLC患者70例，男56例，女14例，男女比例为4∶1。年龄27～83岁，平均(59.4±8.7)岁，采集患者清晨空腹外周静脉抗凝全血2mL，-80℃冰箱保存备用；同时收集相关病例资料，主要包括姓名、病理诊断、性别、年龄、TNM分期、细胞核相关抗原(nuclear associated antigen ，Ki-67)阳性细胞数表达水平等。同时，选取同期在兰州军区兰州总医院体检中心健康体检者40例为对照组，其中男32例，女8例，男女比例为4：1，平均年龄(59.1±5.2)岁，采集患者清晨空腹外周静脉抗凝全血2mL，-80℃冰箱保存备用。

    表1 非小细胞肺癌组与健康对照组年龄、性别的比较

    1.2 外周血端粒长度的测定

    应用 Super Real Pre Mix Plus(SYBR Green)实时荧光定量试剂盒对每个样本分别进行端粒Tel和单拷贝基因36B4扩增，两个基因均做4个重复管，扩增完成后， ABI(7500)实时荧光定量 PCR仪自带分析软件可以分析得到所测样品的荧光起始循环数(Ct值)。根据Ct值计算该样本的相对端粒长度。计算原理参照曹东维[4]和Richard M.Cawthon[5]计算原理，每经过1个循环扩增，PCR 产物量增加翻倍，端粒与单拷贝基因的比率及T/S比率为ΔCt=Ct目的基因-Ct内参基因，ΔΔCt=ΔCt样本-ΔCt内参，以2-ΔΔCt表示外周血端粒长度 ......