邱文娜 吴宏斌 方朝东 王永智 熊吉滨

    江苏省泰州医药高新技术产业园区疫苗工程中心，江苏泰州 225300

    艾塞那肽(Exendin-4)是合成肽类，具有肠促胰岛素分泌激素(Incretin)类似物效应。该产品首次由美国Amylin制药公司开发合成，主要用于控制血糖，改善胰岛素抵抗[1-3]。目前该药品无其他公司生产，且无药典收藏质量标准，本实验室利用基因工程技术，经过纯化、浓缩、冻干等工艺，得到重组艾塞那肽。蛋白含量是该产品质量控制的一项重要内容，本实验室依据中国药典2015年版三部/四部通则0731 第二法，经过方法学验证，建立了本产品蛋白含量测定的方法[4-8]。

    不确定度是与测量结果相关联的参数，测量结果的表述需同时包含被测量值及与该值相关的测量不确定度[9-11]，本文依据《测量不确定度评定和表示》、《检测和校准实验室能力的通用要求》中的有关规定，参考已发表文章的方法[12-13]，对艾塞那肽蛋白含量测定的不确定度进行分析[12-17]，以期望找到影响其不确定度的各种因素，为客观评价艾塞那肽蛋白含量的检验结果提供科学依据。

    1 实验材料

    1.1 样品

    艾塞那肽由本实验室提供，样品约2mg/支。

    1.2 主要试剂及仪器

    碱性铜溶液(国药集团化学试剂有限公司，临用前配制)；牛血清白蛋白(中国食品药品检定研究所，批号为 140619-201622)；酚试剂(2N，Sigma101308200)；水为超纯水，其他试剂为分析纯；电子天平 Sartorius BSA224S-CW；紫外分光光度计Thermo Biomate3s。

    2 检测方法

    2.1 酚试剂准备

    用移液管取2N 酚试剂10mL置棕色瓶中，并加入10mL水配制成1N浓度酚试剂。

    2.2 标准蛋白质溶液制备

    精确称取0.1g牛血清白蛋白，加100mL水定量稀释至1mg/mL作为贮备液；用移液管精密量取贮备液2.5mL置25mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，即为100μg/mL的标准蛋白质溶液。

    2.3 样品制备

    精密称取样品约2mg至试管中 ......