叶国荣 张文茹 舒建昌 周文杰

    广州市红十字会医院消化内科，广东广州 510220

    肝纤维化是由各种致病因子刺激所致的肝细胞坏死，引起肝内弥漫性细胞外基质(extracellular matrix， ECM)过度沉淀的病理过程，是各种慢性肝病向肝硬化发展过程中关键环节，是肝脏对自身损害的一种自我修复反应，其实质是以Ⅰ、Ⅲ型胶原为主的细胞外基质合成与降解失衡，更大程度由于ECM 降解减少引起。在肝纤维化的发生发展过程中，一系列的细胞因子被激活并发挥了重要的作用。常见的细胞因子有转化生因子-β(TGF-β)、血小板源生长因子(PDGF)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、表皮生长因子(EGF)、ROS(过氧化氢、超氧游离基)基质金属蛋白酶-2(MMP-2)金属蛋白酶组织抑制因子-2(TIMP-2)、结缔组织生长因子(CTGF)等，研究表明，相关细胞因子的表达，可以引起肝星状细胞(hepatic stellate cell，HSC)活化，促进肝纤维化的发生发展[1]。本工作拟观察自拟复方中药汤剂治疗大鼠肝纤维化时肝组织中MMP-2、TIMP-2、CTGF 的表达，初步探讨自拟复方中药汤剂治疗肝纤维化的机制。

    1 实验材料

    1.1 主要药物、试剂

    四氯化碳，分析纯，天津市北宏试剂厂生产；食用花生油；羧甲基纤维素钠，广州器化医疗设备有限公司进口分装；苏木素、伊红购自美国SIGMA 公司；兔抗鼠MMP-2 多克隆抗体、TIMP-2 多克隆抗体、CTGF 多克隆抗体均购于武汉博士德生物工程有限公司；超敏广谱S-P 试剂盒、DAB 显色试剂盒均购于福州迈新生物技术开发有限公司。

    1.2 动物及实验环境

    SPF 级 SD 大鼠，雄性，体重(213.98±15.34)g，日龄(43.5±1.5)d， 各组的一般资料比较，差异无统计学意义(P > 0.05)，具有可比性。SD 大鼠由广州中医药大学实验动物中心提供[ 动物质量合格证号：SCXK(粤)2003-0001 粤监证字2005A031]。于广东省药物研究所标准SPF 实验室(合格证号：粤监证字2005C125 号)进行动物饲养及实验。

    2 方法

    2.1 肝纤维化模型的建立

    每只大鼠腹腔注射四氯化碳(花生油1 ∶ 6 稀释)0.025mL×3 次，共 8 周。

    2.2 自拟复方中药汤剂熬制及给药

    姜黄(低姜黄组10g、中姜黄组20g、高姜黄组30g) ......