苏怀轩 樊友凌 江伟航 潘杰慈 黄政通

    广州市番禺区中心医院麻醉科，广东广州 511400

    布比卡因(bupivacaine)是一种氨基酰胺类的局部麻醉药[1]，常用于临床局部麻醉和止痛，但有报道显示布比卡因会引起神经细胞凋亡[2]，对神经系统产生毒性，导致神经元损伤，进而造成患者运动或感觉障碍，严重影响了患者生活。随着局麻药在临床手术中广泛的使用，其周围神经毒性逐渐引起人们的重视，其中以短暂神经综合征(transient neurologic syndrome，TNS)、马 尾 综 合 征(caude equina syndrom，CES)最为常见。局麻药神经损伤的防治成为临床麻醉中的重要课题。姜黄素是一种低分子量的多酚化合物[3]，是中药姜黄的主要活性成分，具有多方面的药理作用[4]。SH-SY5Y细胞是人神经母细胞瘤细胞，被广泛运用于构建神经细胞损伤模型，研究神经系统疾病的发病机制和预防治疗手段[5]。

    抗氧化蛋白PRDX3属于硫氧还蛋白过氧化物酶家族[6]，位于线粒体基质，主要作用是清除线粒体内过氧化物，在细胞抗氧化防御体系及维持线粒体内环境稳态过程中发挥重要作用[7]。

    本科研小组通过前期实验构建了布比卡因损伤人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞模型[8]，发现姜黄素预处理12h能减轻布比卡因所致的SH-SY5Y细胞凋亡[9]，并通过细胞形态、细胞活力和凋亡率等指标的变化明确姜黄素的神经保护作用[10]，同时通过对线粒体途径介导的SH-SY5Y细胞凋亡的相关研究探讨抗氧化蛋白PRDX3的作用及其可能机制，发现PRDX3的高表达可能是导致这一保护作用的机制，为临床防治局麻药神经损伤提供了新的理论依据和方法。

    1 资料与方法

    1.1 仪器与材料

    (1)仪器

    FACSsort流式细胞仪(美国BD 公司)，BX260型荧光显微镜、CK30 型倒置相差显微镜(日本Olympus 公司)；Sunrise RC+TW型遥控酶标分析仪(奥地利Tecan 公司)。

    (2)细胞株

    人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞购自中国科学院上海细胞所。

    (3)试剂和药品

    姜黄素、布比卡因、MTT、Hoechst33258 荧光染料(美国sigma公司)；

    1.2 方法

    (1)SH-SY5Y细胞培养

    SH-SY5Y细胞在含15%胎牛血清的DMEM/F12培养基、5% CO2、37℃条件下培养 ......