阮志燕 陈庆凤 赖满香

    广东食品药品职业学院药学院，广东广州 510520

    盐酸芬戈莫德(FTY720)作为一种新型免疫抑制剂治疗器官移植[1]和多发性硬化[2]等免疫性疾病，主要激动S1P受体，从而具有特异性免疫抑制功能[3]。近年来，不断有文献报道FTY720可以抑制动物模型的肿瘤的生长和转移[4-5]和增强抗癌药的抗肿瘤活性[6]，抗瘤机制不尽相同，涉及鞘氨醇激酶、原癌基因等多个方面[7]。肿瘤细胞逃避患瘤机体的免疫杀伤作用一直是抗肿瘤免疫研究的重点，从提高机体抗肿瘤免疫的角度寻找有效的抗肿瘤药物是目前的常规方法。选择IFN-γ对肿瘤细胞的杀伤作用[8]和Tregs的免疫抑制功能[9]作为研究肿瘤免疫的主要指标。通过检测免疫效应细胞分泌IFN-γ的量和Tregs的数量及免疫抑制功能的变化来观察肿瘤机体的免疫状态，结合药物的抗瘤效果，对肿瘤模型的免疫状态有重要的提示意义[10]。本研究着重于观察盐酸芬戈莫德对荷瘤小鼠肿瘤免疫相关因子效应T细胞、IFN-γ和Tregs细胞的影响，以期了解盐酸芬戈莫德的抑制肿瘤作用。

    1 资料与方法

    1.1 细胞和药物

    小鼠结肠癌细胞株CT26.WT(CT26)；盐酸芬戈莫德(FTY720，纯度≥98%)。

    1.2 实验动物

    SPF级别雌性BALB/c小鼠，6～7周龄，体重(16±2)g，购自于广东省实验动物中心。

    1.3 主要试剂和仪器

    PMA/Ionomycin/BFA/Monensin mixture(250×)(杭州联科生物技术有限公司)，I型DNA酶和透明质酸酶(上海易立生物科技有限公司)，单克隆抗体FITC anti-mouse CD3e、PE-Cy7 anti-mouse CD8a、APC anti-mouse CD25、PE-Cy7 anti-mouse CD3、FITC anti-mouse CD4、PE anti-mouse IFN-γ、PE anti-mouse IL-10(美国eBioscience公司) ......