贾光辉 郭 民

    内蒙古自治区乌兰察布市中心医院普外科，内蒙古乌兰察布 012000

    结直肠癌(CRC)在全世界范围内均有较高的发病率，位居全省恶性肿瘤第3 位，近些年受多种因素影响我国疾病发病率呈上升趋势，早期有效筛查、诊断疾病对改善患者预后、提高患者生存率有重要意义[1]。RUNX3 基因是近年新发现的一种抑癌基因，其通过参与TGF-β 信号传导调控细胞分化、恶变、凋亡等过程[2]。有研究指出RUNX3 基因表达下调与基因启动子区域甲基化有关，而RUNX3基因表达下降，会导致TGF-β 信号传导抑制，造成细胞凋亡失控，从而促肿瘤生长、转移，其可能成为临床肿瘤预后评估重要指标[3]。本研究通过观察结直肠癌组织、正常黏膜组织RUNX3 甲基化状态，分析基因甲基化与疾病预后的关系，旨在为今后疾病早期诊断提供依据。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料

    选择2012年5月～2013年11月病理确诊为原发性CRC 患者59 例为研究对象，所有患者均行根治性切除治疗，医院伦理委员会审核通过，患者病历资料完整，未合并其他恶性肿瘤，未行放化疗，签署知情同意书。获取患者癌组织、正常黏膜组织(距肿瘤边缘10cm 以上)，标本取出后即刻液氮冷却。患者年龄31～69 岁，平均(47.2±5.3)岁，肿瘤直径3.5～7.8cm，平均(5.0±1.3)cm，位置：直肠35 例、结肠24 例。

    表1 不同组织RUNX3蛋白表达、甲基化状态[n(%)]

    1.2 试剂、仪器

    试剂、仪器：DAB 显色试剂盒、鼠抗人RUNX3单克隆抗体(美国Sigma 公司)、免疫组化SP 试剂盒(福州迈新生物技术有限公司)、DNA 提取试剂盒(中山大学达安基因有限公司)、甲基化酶(美国New England Biolabs 公司)、甲基化试剂盒(美国Zymo Research 公司) ......