白耀霞 任建元

    重庆市渝东卫生学校，重庆 408300

    肠球菌是一种常见的条件致病菌，可引起人类多种传染病。近年来，肠球菌导致的院内感染及死亡率明显增加[1]，因此要对其引起的感染给予足够的重视。本研究收集临床感染的肠球菌，检测分离菌株的毒力基因及分离株对常用抗生素的耐药情况，然后分析肠球菌毒力基因与耐药性二者之间的相关性，旨在为肠球菌临床感染抗菌药物治疗提供重要指导，为肠球菌致病机制的进一步研究奠定基础。

    表1 本研究所用引物

    1 资料与方法

    1.1 一般资料

    试验菌株(70株非重复肠球菌)由苏州大学第一附属医院惠赠，分离自苏州大学第一附属医院2014年3月～2018年7月的临床标本。菌株均已经法国Bio-Merieux公司vitek 2 Compact 60生化鉴定或法国Bio-Merieux公司vitek MS质谱鉴定。药敏纸片为青霉素G、万古霉素、环丙沙星、利奈唑胺、替考拉宁、氨苄西林、庆大霉素120、四环素，部分菌株采用法国Bio-Merieux公司vitek 2 AST-GP67药敏卡药敏分析。

    1.2 方法

    1.2.1 药敏试验 采用纸片扩散法(K-B法)、AST-GP67阳性菌药敏卡对分离的70株肠球菌进行药物敏感试验。试验操作过程和结果判断参考CLSI M100 《抗微生物药物敏感性试验的执行标准》2017年版本标准。

    1.2.2 制备肠球菌DNA模板 采用水煮法制备肠球菌DNA模板：刮取血平板上新鲜培养物，加入有200μL灭菌蒸馏水的1.5mL EP 管内，混匀，100℃煮沸15min，离心机12000rpm离心5min ......