刘 云 孙静芳 李朋朋 马 萍

    徐州医科大学附属医院检验科，江苏徐州 221002

    免疫性血小板减少症(immune thrombocytopenia，ITP)是一种后天获得的自身免疫出血性疾病，其病因尚未完全明确，ITP患者主要表现为血小板数量减少、骨髓巨核细胞数正常或增多伴成熟障碍、产板不良。目前研究表明，ITP发病是由细胞免疫和体液免疫共同参与的免疫功能异常[1-2]。有小样本临床试验证明，ITP患者存在调节性B细胞(regulatory B cell，Breg)数量的降低，其发挥作用可能与分泌白细胞介素-10(IL-10)调节th1/th2的平衡及参与诱导效应T细胞的凋亡有关[3-4]。本实验通过对ITP疾病模型小鼠注射经流式分选的Breg细胞，探究Breg细胞对该疾病的治疗效果，以期为临床ITP治疗提供新思路，现报道如下。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料

    实验所用Balb/c小鼠购于南京大学模式动物研究所，小鼠均为8～10周龄的SPF级鼠，共需60只，并饲养于徐州医科大学IVC系统。

    1.2 仪器与试剂

    抗鼠CD4-FITC、CD5-APC、CD19-FITC、CD25-PE、CD1d-PE、Foxp3-APC抗体均购于美国BD公司；FACS Calibur流式细胞仪购于美国BD公司；淋巴细胞分离液购于天津市灏洋生物制品有限责任公司；血细胞计数仪购于迈瑞生物医疗电子股份有限公司。

    1.3 方法

    1.3.1 磨脾制备小鼠Breg细胞 脱颈处死小鼠后放至碘仿中浸泡5min，在超净台内无菌的条件下分离小鼠脾脏，取好的脾脏暂时放入冰的PBS中，随后放置于200目滤网上研磨，边研磨边加小鼠淋巴细胞分离液 ......