佘 军 高迎春 来汉江 王 贤 饶焕新 贺君丽 孙 刚 周艳琼▲

    1.杭州市萧山区第一人民医院临床微生物科，浙江杭州 311200；2.杭州优思达生物技术有限公司，浙江杭州 310053

    结核病是由结核分枝杆菌引起的传染性疾病，以肺部感染最为常见，是仅次于艾滋病所引发的第二大致死传染病，严重威胁人类健康[1]。据世界卫生组织(WHO)2019年全球结核病报告，2018年约有1000万结核新发病例。WHO将结核病作为重点控制的传染病之一。我国高度重视肺结核的预防和控制。为进一步提高结核病的病原学诊断率，“十三五”全国结核病防治规划要求，我国东中部地区和西部地区分别有80%和70%的县(市、区)应具备开展结核病分子生物学诊断的能力[2]。而痰液的病原学检查，如涂片镜检、痰液培养、核酸检测等方法，是辅助结核病诊断的重要手段[3]。考虑到许多区县级实验室的人力资源有限，样本量较少，可能采取连续几天存样，再集中检测的工作模式。根据国卫办疾控函〔2016〕672号和中疾控疾控便函〔2017〕80号通知，我国对结核病试行分级诊疗模式，痰液样本或需要运送至上级医院(如地市级、省级医院或疾病控制中心)进行菌种鉴定、药敏试验等检验。在痰结核分枝杆菌检验过程中，对阳性率的影响因素众多，如痰液采集方法、时机、痰液性状及质量、转运等[4-14]。如何保证样本在储存或运输后不会影响后续分子诊断结果，成为迫切需要研究的问题。

    本研究旨在探讨痰样本保存条件和保存时间对痰液样本中核酸检测结果的影响。寻找妥善的痰液保存方式以保证核酸检测结果的准确性，为基层实验室分子生物学诊断工作的开展提供参考依据。

    1 资料与方法

    1.1 样本来源

    痰液样本来自杭州市萧山区第一人民医院临床微生物科室在2018年11月～2019年1月日常检验的剩余样本104例。

    1.2 样本筛选

    选取痰液样本体积不少于1.5mL。

    1.3 样本分装

    将每份痰液分别分装为2～3等份，每份0.5mL，保存于2mL冻存管中。

    1.4 保存条件及检测组别设置

    (1)室温稳定性试验。将痰液样本和温度记录仪(深圳市华图测控系统有限公司)存放于室温环境下，以试验开始记为第0天。分别在第0天、第5天和第8天 ......