海藻多糖急性毒性试验考察
灌胃,脏器,1材料与方法,1试验材料,2方法,3观察指标,4统计学方法,2结果,1海藻多糖对小鼠及大鼠LD50试验,2海藻多糖对小鼠及大鼠的最大耐受剂量试验,3讨论,1试验动物选择,2评价方式及初步论断
范文彤天津生物化学制药有限公司品质部,天津 300308
海洋藻类植物极其丰富,海藻中包括两种生物活性物质,一种分子量较小,吸收后能直接或间接影响体内代谢,主要包括卤族化合物、萜类化合物、溴酚类化合物、对苯二酚、海藻单宁、昆布氨酸等;另一种是难以被消化吸收的细胞间粘性多糖,主要包括褐藻中的藻酸、褐藻糖胶、硫酸多糖、红藻中的琼胶、卡拉胶等[1]。海藻多糖属于第一种生物活性物质,是海藻中含量较高的成分之一,许多研究已经证明海藻多糖不仅具有抗肿瘤和抗病毒的功能[2],还具有抗凝血、抗氧化及降血脂与将血胆固醇等功能[3],另据相关文献报道其还可用于感染性疾病的预防和治疗[4]。尤其是近年来,国内外专家们虽均致力于海藻多糖的药理功能、生物活性功能的研究,并且取得了长足的发展,可是对于其药理学、毒理学方面的研究报道却很少,为此,笔者考察了海藻多糖的急性毒性即先对小鼠及大鼠灌胃给予最大体积、最大浓度海藻多糖,进行半数致死量(LD50)考察,如试验不能确定LD50,则对小鼠及大鼠灌胃给予最大体积、最大浓度海藻多糖,进行最大耐受剂量考察,通过观察给药后海藻多糖对小鼠、大鼠急性毒性的影响,得出最大耐受量,以期为临床药理学及临床安全用药提供试验数据支持与参考。
1 材料与方法
1.1 试验材料
1.1.1 受试药物 海藻多糖:供试药,深棕色粉末,由天津生物化学制药有限公司公司制备后提供(取中药海藻洗净去杂质,鼓风干燥后粉碎,1倍量蒸馏水浸泡3h,弃初浸液,复加9倍量蒸馏水浸泡3h,回流提取4次,首次提取时间为6h,后3次每次提取时间为4h,弃中药残渣合并提取液,减压浓缩,浓缩液加95%醇沉,醇沉液浓度为73%,静置24h,离心,弃上清取沉淀真空干燥,即得粗品;取粗品粉碎后,加无水乙醇醇洗4次,真空烘干粉碎后,即得精品,精品为深棕色粉末;取精品粉碎后,加入活性炭脱色,经透析及再次醇沉后,真空烘干粉碎,即得纯品,纯品为白色或类色粉末,由于纯品制得收率较低且一般用作对照品应用于理化分析使用,故本试验采用精品进行试验考察[5]),批号为091005,含量为64%(以海藻多糖计),临用前以3%聚乙烯吡咯烷酮(PVP)或蒸馏水配制成最大浓度的混悬液,供灌胃使用。
1.1.2 供试动物 小鼠,昆明种,雌雄各半,体重18~21g,由天津药物研究院动物研究室繁殖,“试验动物设施合格证”由天津实验动物管理委员会颁发,符合一级标准,正常饲养3d后供试。大鼠,Wister,雌雄各半,体重160~220g,由天津药物研究院动物研究繁殖 ......
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