640 nm红光照射对人真皮成纤维细胞增殖的时间剂量依赖性效应及对TGF-β相关基因mRNA表达的影响
1材料与方法,1实验材料,2方法,2结果,1人真皮成纤维细胞的鉴定,2不同强度的640nm红光照射对人真皮成纤维细胞周期的影响,3不同强度的640nm红光照
易 斌 郭庆霞 何 军 韩克影 凡静静1.北京创盈光电医疗科技有限公司,北京 100176;2.北京勤邦生物技术有限公司,北京 102206
妊娠纹是由于孕期腹部隆起后皮肤出现的波浪状花纹,分娩后花纹逐渐消失形成有光泽的瘢痕线纹,即妊娠纹[1]。妊娠纹严重影响女性的皮肤美观,因此受到社会广泛的关注。妊娠纹的治疗主要包括药物治疗、激光治疗、微创手术治疗、红光治疗等[2-3],但是目前无明确的治疗方法。妊娠纹产生的机制涉及内分泌调控、遗传基因易感性以及表皮细胞的增殖等[4-5],但是最终的调控核心是皮肤中胶原纤维和弹力纤维的减少及断裂[6-7]。皮肤被拉伸形成妊娠纹的过程中,拉伸力使成纤维细胞收缩衍变成肌纤维母细胞[8]。妊娠纹的肌纤维母细胞处于静止状态,不能合成胶原蛋白和弹性蛋白[9-10]。因此妊娠纹的治疗主要调控成纤维细胞促进胶原纤维和弹性纤维的表达。红色光波一般介于600~700 nm,红光治疗主要依赖光化学作用,而不是能量作用[3]。目前红光治疗主要应用于消炎、加速组织修复、促进骨折愈合、淡化瘢痕等领域[11-12]。640 nm主要应用于皮肤治疗领域。妊娠纹是皮肤损伤后留下的痕迹[13],而640 nm红光治疗妊娠纹的作用机制不明确。本研究将采用不同强度(时间)的640 nm红光照射人真皮成纤维细胞,检测细胞的增殖和凋亡,同时检测转化生长因子β(transforming growth factor β,TGF-β)、胶原(collagen,Col)、Smad2和Smad3的基因表达,为640 nm红光治疗妊娠纹提供理论基础。
1 材料与方法
1.1 实验材料
1.1.1 细胞 人真皮成纤维细胞(SCIENCEL)
1.1.2 实验试剂 成纤维细胞培养基(诺唯赞生物科技股份有限公司,R401-01)、吉姆萨染色液(索莱宝,G1015)、台酚蓝染色液(索莱宝,C0040)、胰酶 -EDTA(索莱宝,T1300)、噻唑蓝(GIBICO,M6494)、Trizol(ThermoFisher,15596026)、反转录试剂盒(ThermoFisher,4368813)、ABsolute Blue QPCR Mix、SYBR Green、Low ROX(ThermoFisher,AB4323A),其他化学试剂为国药产品 ......
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