景晓彤 黄 勇 黄玉婷 蔡 毅

    广西中医药大学药学院，广西南宁530200

    中成药常见的传统剂型主要有散剂、膏剂、丸剂、酒剂、茶剂、丹剂和锭剂等[1]。随着现代科技不断发展和突破，在中医药理论指导下，中成药剂型取得了很大的改良和提升。现代新剂型取代传统剂型成为临床常用剂型，包括注射剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂、口服液、浓缩丸和微丸等。中成药的品种数目很多，提取工艺复杂，鉴定难度不断加大，因此需要更为科学、严谨、客观的中成药鉴定技术，才能满足现代剂型中成药鉴定的需要。《中华人民共和国药典》(2020年版)[2]收载用于中成药鉴别的方法主要有薄层色谱法、显微鉴别法、荧光法、沉淀法、显色法、升华法、燃烧法、结晶法等。近年来，由于DNA分子标记技术具有灵敏度高和特异性强等特点，成为国内外中药材鉴定方面的研究热点[3-10]，但是分子鉴定技术应用于中成药鉴定方面的研究较少。

    中成药DNA提取质量是开展中成药分子鉴定等研究的前提，同时也关系到中成药基因文库的建立以及分子克隆、高通量测序等技术的研究。在中成药DNA提取过程中，提取方法、纯化技术等对中成药DNA质量有较大的影响。因此，本文对近些年来中成药的DNA提取方法(CTAB法、SDS 法、试剂盒法、磁珠法、乙醇沉淀法)进行系统整理，为中成药分子鉴定深入研究提供理论参考。

    1 DNA提取及纯化原理

    1.1 破碎细胞

    将植物或动物的组织在液氮中研磨。液氮的温度低至-196℃，既能使各组织成分不易被破坏或者降解，又能使组织变硬，质脆，易于研磨。经液氮速冻后，破胞效果更好，能有效释放细胞内物质，同时又可终止细胞内外的一切生物反应，避免DNA酶发生降解，维持基因组DNA的稳定。

    1.2 DNA的获取

    在细胞核中，DNA存在的形式是和组蛋白结合形成染色质，而离子型表面活性剂如溴化十六烷三甲基胺(sodium dodecyl sulfate，SDS)、十二烷基硫酸钠(cetyltrimethyl ammonium bromide，CTAB)等能有效破坏细胞膜 ......