应用MHC肽四聚体技术检测类风湿性关节炎患者CCP抗原特异性T细胞及初步临床应用
阳性细胞,1资料与方法,1一般资料,2试剂材料,3分离PBMC,4流式细胞术的准备,5检测抗体,6调节流式细胞仪检测CCP,AST,7统计学分析,2结果,1三组CCP,AST检测
房国祥 虞 伟1.江苏省常州市德安医院检验科,江苏 常州 213000;2.东部战区总医院基础医学实验室,江苏 南京 210000
自身免疫性疾病是指机体对自身抗体发生免疫反应而导致自身组织损害所引起的疾病,其中类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)在临床较为常见[1],其发病可能与遗传、感染和激素等相关,以滑膜病变和关节改变为重要特征,细胞与体液免疫在RA 的病变发展中发挥了重要作用[2-3]。目前,对于环瓜氨酸肽(cyclic citrullinated peptide,CCP)在RA 的发病中的作用研究较多,可证实RA 的病变严重程度与抗CCP 抗体水平有着紧密联系[4-5],而对于RA 患者的抗原肽的细胞特异性免疫反应研究尚不充分。
MHC 肽多聚体检测技术目前已广泛用于多种肿瘤、结核和疫苗的疗效监测等方面[6-7]。本研究基于流式细胞仪(FCM)结合肽四聚体技术的良好性能,检测了54 例临床病例的外周血单个核细胞(PBMC)中CD4+CD8-tetramer-CCP阳性细胞和作为对照的CD4+CD8- 人中间叶促皮质样肽(hCLIP)-tetramer 细胞,将携带无关肽的四聚体作为非特异性对照,预实验结果提示MHC 肽四聚体技术有一定比例的非特异性结合,为消除此影响,故以两者的差值定义为CCP抗原特异性T 细胞(CCP/AST)。分别检测RA患者与自身免疫性疾病对照组患者的CCP/AST比率,以及RA 患者中抗CCP 抗体阴、阳性患者中的比率,研究RA 患者的临床表现与检测结果有无联系。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选取东部战区总医院2018 年4—11 月住院及门诊的确诊患者,包括:RA 组35 例;疾病对照组19 例 ......
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