黄国帅 袁和兴 刘浩然 刘昊鹏

    苏州大学附属第一医院泌尿外科，江苏苏州 215006

    膀胱癌是泌尿系统中最常见的恶性肿瘤，在恶性肿瘤中位列第10位，男性膀胱癌的发病率和病死率大约是女性的4倍[1]。膀胱癌分为非肌层浸润性膀胱癌(non muscle invasive bladder cancer，NMIBC)和肌层浸润性膀胱癌(muscle invasive bladder cancer，MIBC)，NMIBC占绝大多数，大约为75%，而MIBC约占剩下的25%[2-3]。NMIBC复发率较高，5年复发率近50%[4]，给家庭和社会带来巨大的经济负担。因此，需要开发一种简单、廉价、无创的癌症检测方法来诊断与监测膀胱癌。液体活检具有样本易得、创伤小甚至无创等优点，液体活检的样本通常有血液、尿液、唾液及乳液等[5]。尿液由于可进行无创收集，收取尿量的限制相对较小，认为是液体活检的理想体液。尿液中常见的生物分子包括细胞DNA、游离DNA、不同种类的RNA、蛋白质和外泌体。尿液上清液与肿瘤组织的标本一致性强于尿沉渣，尿液游离DNA(urinary cellfree DNA，ucfDNA)可能是尿液沉积物更敏感的替代品[6]。ucfDNA的应用较为广泛，不仅可以用于膀胱癌的诊断，而且在区分不同阶段的膀胱癌、监测术后复发中起积极作用。

    1 尿液游离DNA的起源与特征

    ucfDNA按来源可分为三类：尿路细胞DNA、经肾DNA以及来源泌尿系感染的细菌与病毒DNA。尿路细胞DNA是从泌尿生殖道进入尿液的细胞产生的DNA[7-8]，而经肾DNA是指循环中经肾小球滤过进入尿液的无细胞DNA。泌尿系统肿瘤可将癌变细胞释放到尿液中。基于经肾DNA的假设，多项研究证明非泌尿系统的疾病(结直肠癌、肺癌等[9-10])可以使用尿液游离DNA进行诊断。根据ucfDNA片段大小可进一步分为两类：高分子量ucfDNA和低分子量ucfDNA。高分子量ucfDNA片段长于1 kbp，它们主要来自泌尿生殖道上的坏死细胞或通常存在于尿液中的淋巴细胞。低分子量ucfDNA片段通常来自循环或与尿液接触的凋亡细胞，其片段长度的主要范围在10～400 bp[11] ......