杨 丽 赖烨才 伍双茜 陈婉榕

    广州白云山医药集团股份有限公司白云山制药总厂，广东广州 510515

    头孢克肟(cefixime)为第三代头孢菌素类抗生素，由日本藤泽制药于20世纪80年代研发成功并应用于临床，其对革兰阴性菌有较强的抗菌活性，对多种革兰阳性菌尤其是葡萄球菌抗菌活性较低[1-2]。头孢克肟能与青霉素结合蛋白(PBP)相结合，抑制细菌细胞壁肽聚糖的合成，从而破坏细菌分裂，起抗菌作用[3-4]。目前市场上头孢克肟的剂型很多，但有关微生物限度检查方法研究比较少，且已不适用于新版药典要求，因此建立此类药物合适的微生物限度检查方法是有必要的。在探索头孢克肟片微生物限度检查方法适用性时，只有通过消除其抑菌活性而建立的方法，才能真实反映其微生物污染情况，防止出现假阴性结果，这对该产品生产放行、有效期存放和企业微生物控制体系建立[5]具有重大意义。本研究依照《中华人民共和国药典》(缩写为“ChP”)2020年版四部[6]进行方法适用性试验，通过利用β-内酰胺酶(头孢菌素酶)[7-8]与头孢类药物结合使其抗菌活性降低，结合薄膜过滤法、延长酶作用时间、不影响检验标准选择更高稀释级等方法，发挥协同作用而去除样品的抑菌性，从而为头孢克肟片的微生物限度检查提供合理、有效和可行的方法。

    1 仪器与材料

    1.1 仪器

    BSC-1600IIA2生物安全柜(苏州安泰空气技术有限公司)；EZ-FIT微生物过滤三联支架(美国默克密理博)；BCE822-1CCN电子天平(北京赛多利斯科学仪器有限公司)；BSP-250生化培养箱(上海博迅实业有限公司医疗设备厂)；IN812C低温培养箱(广州贝特生物科技有限公司)；XG1.DTED-0.6D脉动真空灭菌器(山东新华医疗器械股份有限公司)。

    1.2 样品与培养基

    头孢克肟片(白云山制药总厂，批号：02210201-1、02210801、02210802，规格：0.1 g)；头孢菌素酶(≥210万单位/5 ml，苏州普今生物科技有限公司，批号：2103020)。

    胰酪大豆胨液体培养基(TSB)[默克化工技术(上海)有限公司]、胰酪大豆胨琼脂培养基(TSA)[默克化工技术(上海)有限公司]、沙氏葡萄糖琼脂培养基(SDA)[默克化工技术(上海)有限公司]、沙氏葡萄糖液体培养基(SDB)[默克化工技术(上海)有限公司]、麦康凯液体培养基(MacB)(广东环凯微生物科技有限公司)、麦康凯琼脂培养基(MacA)(广东环凯微生物科技有限公司)、pH 7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液(广东环凯微生物科技有限公司)、0.1%无菌蛋白胨水溶液(广东环凯微生物科技有限公司) ......