丹芪护肝方对肝纤维化模型大鼠TGF-β/Smad4信号通路的影响
双酯,联苯,批号,1材料与方法,1实验动物,2实验药物与试剂,3动物造模及给药,4肝脏指数测定,5肝功能测定,6逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肝组织中α-SMA,TGF-β1和Smad
彭馥芝 徐仪昕 蒋 堃 陈思源 余曦明 张 逢 余望贻湖南中医药大学科技创新中心,湖南长沙 410208
肝纤维化是肝脏对自身免疫性、病毒性、药物性等多种慢性损伤的病理性修复反应[1-2]。其发生的中心事件是:在各种慢性损伤因素影响下,肝星状细胞被活化,转化为肌成纤维细胞,与肝脏微环境中的淋巴细胞、内皮细胞等协同作用,通过自分泌等方式共同促进肝脏炎症及纤维化进程[3-4]。因此,在肝纤维化的发生和发展过程中,许多细胞因子以及细胞内的各种信号通路均能对其产生影响[5-8]。丹芪护肝方由丹参、黄芪、女贞子等组成,具有平肝清热,活血行气的功效,临床上用于慢性乙型肝炎和湿热血瘀兼肾虚者,但尚未发现有文献报道丹芪护肝方对肝纤维化的影响。本研究通过制备大鼠肝纤维化动物模型,探讨丹芪护肝方对肝纤维化的保护作用。并通过检测转化生长因子β(transforming growth factor-β,TGF-β)/信号通路通用调节因子4(SMAD family member 4,Smad4)信号通路变化,初步揭示丹芪护肝方对肝纤维化的可能机制,以期为临床诊疗上丹芪护肝方的应用提供理论指导。
1 材料与方法
1.1 实验动物
健康SPF级SD(sqrague dawley)大鼠48只,雌雄各半,体重140~160 g(实验动物质量合格证号:430727211100469235),购自湖南斯莱克实验动物有限公司[许可证号:SCXK(湘)2019-0004];饲养于湖南中医药大学实验动物中心,自由进食及饮水,温度20~25℃,相对湿度为55%~65%。本实验经湖南中医药大学实验动物伦理委员会审查批准通过(伦理号:LL2021031704)。
1.2 实验药物与试剂
联苯双酯滴丸(批号:A02J181131);四氯化碳(批号:C11588428);大豆油(批号:C17900081);逆转录试剂盒(PrimeScript?RT reagent Kit with gDNA Eraser,批号:RR047B);染料法荧光定量试剂盒(SYBR?Premix Ex Taq?Ⅱ,批号:RR82LR);Trizol总RNA提取试剂(批号:DP424);平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin ......
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