邓思珊 刘洪旭 马丽红

    福建省医学科学研究院 福建省医学测试重点实验室，福建福州 350001

    黄酮类化合物是植物在长期的进化过程中为适应生态环境或抵御外界侵袭而形成的一大类次生代谢产物，在长期的生态适应过程中发挥重要作用。查尔酮异构酶(chalcone-flavonoid isomerase，CFI)能够催化查尔酮分子内环化反应，生成(2s)-黄烷酮，是植物体内催化黄酮类成分生物合成的第二个关键酶，CFI基因表达量与黄酮合成量密切相关[1]。

    有关CFI研究非常广泛，在山葡萄、草莓、白木香、盐肤木、光果甘草、红花、紫丁香等多种植物中都报道了该酶基因序列[2-8]。三叶青来源于葡萄科崖爬藤属植物三叶崖爬藤(Tetrastigma hemsleyanumDiel et Gilg)的干燥全草，是福建、浙江地区传统习用青草药[9]，具有清热解毒、祛风化痰、活血止痛等功效，被称为天然抗生素。现代医学表明三叶青有较强的抗炎、抗病毒、抗肿瘤作用[10-11]。实验证实三叶青中含大量以异荭草素、荭草素、牡荆素、异牡荆素等系列为主的碳苷黄酮化合物[12]，碳苷黄酮是一类具有更强抗肿瘤活性的化合物[13]，为阐明三叶青中CFI的结构基因信息及其在黄酮生物合成途径中表达调控机制，本研究基于转录组数据的生物信息学，设计筛选出一批与黄酮生物合成相关的关键基因，根据转录组筛选的多个基因序列设计引物，进行反转录PCR，获得多个产物，经过克隆及测序，首次成功鉴定出1条与其他植物中查尔酮-异构酶具有高度同源序列的三叶青CFI。为后期利用基因工程菌株干预诱导CFI基因增加碳苷黄酮化合物的合成量，从而进一步增强三叶青抗肿瘤活性奠定基础 ......