袁相凤 罗增香 李建娜 孙丽娜

    潍坊医学院附属医院皮肤科，山东潍坊 261013

    白癜风是一种常见的色素脱失性皮肤病，发病率占全球人口的0.5%～2.0%[1]。该疾病的特征是黑色素细胞丢失，导致皮肤出现典型的非杯状白色斑点。近年来，研究者对白癜风发病机制的认识取得了较大进展，目前已明确将白癜风归类为自身免疫性疾病。白癜风不仅影响患者容貌外观，而且会给患者心理上造成沉重的压力，在日常生活导致诸多不便[2]。黑素皮质受体(melanocortin receptors，MCRs)参与了包括色素沉积、摄食、能量代谢、抗感染等各环节的调节。目前已经发现了5 个MCRs家族成员：MC1R ～MC5R，其中黑素皮质受体1(melanocortin 1 receptor，MC1R)蛋白参与黑色素的生物学反应，影响黑色素细胞的产生。MC1R 活性降低会导致头发变红、肤色变浅。另有研究指出，MC1R 活性降低与雀斑、皮肤癌的发生也有关[3-5]。研究发现在白癜风患者皮肤组织中MC1R 基因表达下调，提示MC1R 可能是与白癜风相关的基因[6]。目前MC1R 在白癜风黑色素细胞中调控作用的相关研究报道罕见。因此，本研究探讨MCIR 在白癜风黑色素细胞中的作用和机制，旨在阐明白癜风发生机制，为临床诊治靶点选择提供参考。

    1 材料与方法

    1.1 材料与试剂

    正常人表皮黑色素细胞系PIG1 和白癜风黑色素细胞系PIG3V 购自上海中科院。Trizol 试剂盒和细胞转染试剂盒(美国Invitrogen 公司)，Western Blot 一抗(美国ABCam 公司)，Western Blot 酶标二抗和活性氧(reactive oxygen species，ROS)试剂盒(南京建成生物研究所)，真核表达载体和siRNA(上海吉玛公司)，MTT 试剂盒(德国Thermo 公司)，凋亡试剂盒(美国BD 公司)。

    1.2 方法

    1.2.1 MC1R 真核表达载体和siRNA 转染细胞 PIG1细胞用于构建MC1R 敲减细胞模型 ......