王晖晖 凌冰玉 张继燃 徐继扬(通讯作者)

    (江苏省苏北人民医院急诊科 江苏 扬州 225001)

    目前百草枯致肺纤维化的机制尚不明确，近年来研究表明肺泡上皮细胞可通过上皮间质转化(epithelial-to-mesenchymal transition,EMT)向肌成纤维细胞转化[1]。研究证实EMT是肺纤维化发生发展的重要机制，而肺上皮细胞EMT的发生是肺纤维化形成的重要标志之一[2-3]。

    Rac1(Ras-related C3 botulinum toxin substrate 1)属于小G蛋白超家族的重要成员之一，在多种细胞内具有调节肌动蛋白细胞骨架重组，导致细胞板状伪足形成和膜褶皱样运动，影响细胞形体极化，促进细胞运动与迁移，促进细胞内活性氧(Reactive oxygen species,ROS)产生等作用[4]。本课题组前期研究不同活性的Rac1质粒瞬时转染肝上皮细胞，证明Rac1可促进EMT。但是Rac1在百草枯肺纤维化的EMT中的作用尚不清楚，本文将通过转染不同活性的Rac1质粒到人肺上皮细胞HPAEpiC中，观察其EMT的作用。

    1.材料与方法

    1.1 细胞与试剂

    人肺上皮细胞株HPAEpiC购自美国ATCC；百草枯购于Sigma公司；DEME培养基、胎牛血清购于Gibco公司；MTT试剂盒购于Thermo Fisher公司；Vimentin抗体购于Merck&Millipore公司；α-SMA抗体购于Sigma公司；β-actin、CK-8、E-cadherin购于Bioworld公司；Lipofectamine2000购于Invitrogen公司；ROS试剂盒购于南京建成生物工程研究所 ......