狂犬病毒PV-2061株的病毒滴度测定方法的研究
细胞培养,材料和方法,1病毒及细胞病毒株,2实验动物,3主要试剂,4蚀斑法,5免疫荧光法,6小鼠LD50测定法,结果,讨论
李爽 姚宇 李鹤 田威(通讯作者)(1辽宁成大生物股份有限公司 辽宁 沈阳 110179)
(2沈阳药科大学生命科学与生物制药学院 辽宁 沈阳 110015)
狂犬病,俗称恐水病,是一种由狂犬病病毒感染引起的人兽共患传染病,一旦感染发病,病死率高达100%。狂犬病至今仍无特效的治疗方法,实施疫苗免疫是预防和控制狂犬病发病最有效的措施[1]。在疫苗生产的各项检测指标中,狂犬病毒毒力的测定是至关重要的,其直接关系到疫苗成品的效价和免疫效果。《中华人民共和国药典》三部(2015版)狂犬病毒滴度检测的方法推荐采用小鼠法。但是由于实验动物之间存在个体差异,实验人员操作的熟练程度等诸多因素均会影响实验结果的准确性。细胞法作为病毒滴度测定的一种替代方法,近年来广受国内外学者的青睐,其中蚀斑法、免疫荧光法等都是比较经典的实验方法。
1.材料和方法
1.1 病毒及细胞 病毒株
狂犬病毒PV-2061株第18代,由辽宁成大生物股份有限公司提供,原始毒株来源于ATCC。细胞株:幼仓鼠肾细胞(BHK-21)、非洲绿猴肾细胞(Vero)来源于中科院上海细胞库 ......
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