王丹 肖凌 江绍伟

    (1中国人民解放军第一六一医院 湖北 武汉 430000)

    (2湖北中医药大学检验学院 湖北 武汉 430065)

    结肠癌的发病率以及死亡率是我国恶性肿瘤的第三位，治疗手段主要以手术切除为主，同时联合化疗、放疗来降低复发率，提高生存率。结肠癌的化疗毒副作用大。中药有高效低毒的特点，近年来在肿瘤的后期治疗中起到一定的作用[1]。苦参碱是中药苦参的主要活性成分之一，近年来发现其能够诱导肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤细胞增殖而发挥抗肿瘤作用。本实验主要研究MA对人结肠癌Caco-2细胞的致凋亡作用，探讨其对结肠癌可能的作用机制，为中药在肿瘤治疗方面的应用提供一定的理论依据。

    1.材料与方法

    1.1 材料与试剂

    人结肠癌Caco-2细胞由湖北省肿瘤医院实验中心提供。苦参碱购自Sigma公司，用RPM1640(美国Gibco公司)助溶，终浓度为200mg/ml，0.22滤器除菌，-20℃保存，临用时加培养液稀释至所需浓度；二甲基亚砜(DMSO)﹑噻唑蓝(MTT)为南京凯基公司产品；其他试剂购自广州瑞博公司。

    1.2 细胞培养和MTT测定

    结肠癌细胞Caco-2常规培养于RPMI 1640培养基(含10%的小牛血清)，置37℃、5% CO2孵箱内静置培养 。取对数生长期的细胞，采用0.25%胰酶消化后，将细胞密度调整为l×l05/ml。以每孔200μL接种于微孔板，分别加入苦参碱，终质量浓度分别为2、4、8、16和32mg/ml，每组设3个复孔，分别培养24，36和48小时，对照组仅加等量的培养液。每孔加 MTT(5g/L)20μl，培养4h后 ......