周志兵 张剑锋(通讯作者) 向沥 李霁 罗毅丰

    (广西壮族自治区广西医科大学第二附属医院急诊科 广西 南宁 530007)

    百草枯(paraquat poisoning，PQ)是民间常用的廉价除草剂，除草效果好而被广泛应用，因此也成为了急诊病人常见的中毒原因之一[1]。既往研究发现，PQ中毒的病人早期即可发现肺组织的弥漫性炎症反应，以急性肺损伤病理变现为主，出现上皮细胞损伤，肺泡内的水肿和出血，大量的炎性细胞浸润，晚期导致以肺损伤为主的多器官功能障碍综合征[2]。百草枯中毒救治成功率低，致死率高达60%～90%。目前关于百草枯中毒的机制尚不明确，研究表明炎症反应失衡以及氧化应激是百草枯中毒的重要机制，本课题组前期研究发现肿瘤坏死因子TNF-α作为重要的炎症介质在百草枯中毒大鼠中是增高的[3]。p38属于MAPK家族中的一员，它作为上游的环境压力应激反应蛋白而能影响TNF-α的表达，关于p38 MAPK阻滞剂在百草枯中毒急性肺损伤大鼠中对TNF-α的影响的报导罕见，本研究将以百草枯灌胃来制作百草枯中毒急性肺损伤大鼠模型，应用p38 MAPK阻滞剂SB203580干预后，观察肺组织中TNF-α的变化。

    1.资料与方法

    1.1 实验动物

    健康成年SPF级雄性SD大鼠36只，体重200～250g，由广西医科大学动物中心提供，动物使用许可证：SYXK桂2014-0003。饲养温度(20±2)℃，自由进水，普通饲料喂养。

    1.2 主要试剂、药品和仪器

    二氯百草枯结晶体(Sigma公司，美国)，p38 MAPK阻滞剂SB203580，RNA保存液，RNA提取试剂盒，逆转录试剂盒购于TaKaRa公司，ELISA 试剂盒购于华美公司，目的基因引物序列设计合成由南宁科迪公司完成。目的基因碱基序列：β-actin上游引物5'-GGAGATTACTGCCCTGGCTCCTA-3'，下游引物5'-GACTCATCGTACTCCTGCTTGCTG-3'；TNF-α上游引物5'-GGCGTGTTCATCCGTTCTC-3'，下游引物为5'-CTTCAGCGTCTCGTGTGTTTCT-3'；p38MAPK 上 游引 物5'-GTGTCGGTGATGTCAGATGG-3' ......