南方红豆杉水提物对TGF-β 诱导的NCI-N87 细胞上皮间质转化的影响
空白对照,资料与方法,1细胞与细胞培养,2药物,3试剂及仪器,4方法,5统计学方法,结果,1南方红豆杉水提物抑制TGF-β诱导的NCI-N87细胞在体外划痕,迁移和侵袭实验,2南方红豆
邹媛媛(杭州市萧山区中医院消化内科 浙江 杭州 312000)
胃癌是常见恶性肿瘤之一,发病率居高不下。最近的国家癌症中心数据显示,胃癌在男性恶性肿瘤中发病排第2 位,女性第5 位,预后相对差,整体病死率位列第3 位[1]。南方红豆杉已被证明[2],可抑制致癌物活化、血管生成、抗侵袭和转移,还具有调节细胞的存活率。目前已知南方红豆杉水提物通过抑制PI3K/AKT 信号通路的激活来抑制癌细胞的侵袭,但是,南方红豆杉的抗侵袭、转移的特性,是否与抑制上皮间质转化有关还得进一步确认。本实验通过体外研究,探讨南方红豆杉水提物对胃癌NCI-N87 细胞上皮间质转化(EMT)功能及相关机制,报道如下。
1.资料与方法
1.1 细胞与细胞培养
HER2 阳性人胃癌NCI-N87 细胞,购自中国科学院上海生命科学研究院细胞资源中心,在浙江中医药大学实验中心培养。NCI-N87 细胞培养于5% CO2,37 ℃培养箱(湿度95%)条件下,培养于含10% FBS,青霉素100 U/mL,链霉素100 mg/mL 的RPMI1640 培养基中。实验时取对数生长期细胞。本研究经浙江中医药大学实验中心伦理委员会批准(伦理审批号:KYLL-2020-127)。
1.2 药物
南方红豆杉,规格8 g/包,采购自宁波泰康红豆杉生物工程有限公司。将80 g 南方红豆杉放置于无菌容器中进行浸泡,过夜浸泡12 h,再使用8 倍清水将其煮沸30 min,倒出药液。将药液放入5 倍清水中,煮沸20 min,使用真空抽滤器对药液进行过滤,并将其中水分蒸发至100 mL,此后使用旋转蒸发仪,通过水浴法将药液浓缩至40 mL,再使用真空干燥箱对其进行干燥,得浸膏,其浓度计算后为10.65%。取用1 g 南方红豆杉膏状提取物放入10 mL 超纯水中,待其溶解后,使用高速冷冻离心机12 000 rpm 对其进行离心15 min 后取上清液,再通过0.22 μm 微孔滤膜进行除菌处理,最后制成母液浓度100 mg/mL,并置于-20 ℃的冰箱中备用 ......
您现在查看是摘要页,全文长 8207 字符。