陈俊杰

    (广州中医药大学第二附属医院药学部制剂科 广东 广州 510000)

    CVB-D 是从黄杨科植物小叶黄杨及同属植物经酸性醇提、碱化、萃取、重结晶所得的甾体生物碱，也称环维黄杨星D 环常绿黄杨碱D、黄杨宁、黄杨碱等，有抗心律失常、抗心肌缺血、舒张血管、降血压等生理活性，临床用于治疗冠心病、心绞痛、心律失常、心肌缺血等疾病。其分子式为CHN，是一种白色针状结晶，结构式见图1。中国药典(2000 版)采用非水滴定法测定CVB-D 含量，但此方法测定样品中总生物碱含量，缺乏专属性。

    图1 CVB-D 结构式

    脂质体是一种人工合成膜。磷脂分子亲水头端插入水中，亲水尾端伸向空气，混合搅拌后形成类脂质双分子层结构的球状脂质体。脂质体具有类似细胞膜的特点，可使药物递送到细胞内部。脂质体具有可包封难溶性药物、毒性小、生物相容性高等特点发展迅速。脂质体的质量评价包括形态、粒径、包封率、载药量和稳定性等，而包封率是筛选脂质体制备工艺和评价其质量的重要指标，对提高药物治疗作用、减轻药物不良反应以及降低药物剂量作用极大。在《中国药典(2010 版)》中，脂质体制剂指导原则中规定脂质体包封率不得小于80%。包封率的检测需分别测定脂质体药物总含量和脂质体外的游离药物含量，然后再通过公式得出包封率，而分离脂质体与游离药物的方法通常有采用柱层析法、超滤离心法、透析法、鱼精蛋白沉淀法、荧光法等。

    本研究旨在采用超滤离心法从脂质体中分离出游离CVB-D 后，利用UPLC-MS/MS 测定CVB-D 含量，从而计算脂质体包封率。由于超滤离心法的离心速度和时间对超滤离心管洗脱能力影响较大，所以本实验先建立UPLCMS/MS 测定CVB-D 方法 ......