葛根素对骨癌痛大鼠的治疗效果作用机制研究
脊髓,材料和方法,1实验动物和细胞,2实验药物与试剂,3模型建立及分组处理,4自发缩足次数(Flinches)记录与机械痛阈值(PWT)检测,5转棒运动实验,6免疫印迹法,7统计学方法,结果,1葛根素会缓解大鼠骨癌痛行
曹媛媛,杨荷雨,朱海丽(通讯作者)(湖北科技学院医学部药学院 湖北 咸宁 437100)
骨癌痛是晚期癌症患者的常见症状之一,对患者的日常功能状态和生活质量产生负面影响。
骨癌痛主要表现为痛觉过敏和触诱发痛,常规药物治疗难以达到理想的治疗效果,寻找新的治疗骨癌痛的药物具有重大的意义。葛根素(Puerarin)是从葛属的几种豆科植物葛根的根和野葛根中分离出来的生物活性成分,其在慢性缩窄性损伤、糖尿病性神经病变及紫杉醇诱发的化疗神经痛等多种病理性疼痛中具有较好的镇痛作用。然而,当前葛根素的镇痛机制尚不明确。为明确葛根素在癌痛中作用及机制,本研究构建了乳腺癌骨转移疼痛(cancer-induced bone pain,CIBP)小鼠模型,并给予小鼠葛根素鞘内给药,检测其行为学及脊髓炎症相关蛋白表达变化,从而为葛根素作为镇痛药物的开发提供思路。
1.材料和方法
1.1 实验动物和细胞
雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠(180 ~200 g)购自湖北省实验动物中心,实验动物合格证号:42000600043734,在12/12 h 光/暗循环、恒湿的空调房间中,并提供适量的食物和水。大鼠乳腺癌细胞MRMT-1购自广州吉妮欧生物科技有限公司,来源RCB。本研究所有动物实验均经湖北科技学院实验动物伦理委员会批准(伦理审批号:2020-01-900)。
1.2 实验药物与试剂
葛根素购于上海源叶生物科技有限公司,货号:S02M9B54875,纯度超过98%。动物组织裂解液,SDSPAGE 凝胶快速配制试剂盒,BCA 蛋白浓度测定试剂盒均购自上海碧云天生物技术有限公司;兔抗NLRP3(A12694),兔抗Caspase-1(A0964) ......
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