阳和汤加减调节强直性脊柱炎T细胞功能及骨代谢指标的探讨(2)
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参见附件。
(10 g)-1；模型组予0.2 mL·(10 g)-1生理盐水灌胃；复方组予中药阳和汤加减，按小鼠成人系数9.019折算剂量(约0.5 mg·kg-1)，每日0.2 mL·
(10 g)-1。各组用药均28 d，于第29天取材。
2.4 观察及取材 观察实验小鼠一般状况、饮食、体质量、精神状况、毛色。均于灌胃43 d后，眼眶后静脉丛取血并分离血清后，置-70 ℃冰箱保存，行软骨组织脱钙。脱钙后、常规脱水、透明、浸蜡、包埋、切片。取脊柱、关节行病理组织学切片，行免疫组化法。鼠抗单克隆抗体、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、转化生长因子-β(TGF-β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、RANKL免疫组化试剂(武汉博士得生物有限公司)，取脊柱、关节10%甲醛固定，包埋。
2.5 IHC法检测蛋白表达结果判断 光学显微镜一侧目镜安装细胞计数网格，观察免疫组化阳性细胞的蛋白表达情况及分布情况。细胞呈浅棕色为阳性表达。
2.6 统计学方法 采用SPSS 16.0软件进行统计分析。组间光密度及计数的比较采用单因素方差分析，以P < 0.05为差异有统计学意义。
3 结 果
熟地组大鼠在灌药时因操作失误均死亡，故无统计数据。
3.1 TNF-α的表达情况 见表1。
表1 TNF-α的表达情况
组别阳性细胞数阳性面积总光密度
复方组 9.25±1.264.88±2.8340 860.40±2.92
桂枝组 9 ......
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