2.2苯酚-硫酸比色法测定巴戟天-杜仲多糖的含量

    2.2.1最大吸收波长的选择精密称定称取约105 ℃

    干燥至恒重的无水葡萄糖0.01 g，置50 mL容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀；量取25 mL溶液置于50 mL容量瓶中，稀释至刻度，摇匀，制成葡萄糖标准液。精密吸取葡萄糖标准液0.1 mL

    加蒸馏水稀释至1 mL，加入质量分数5%苯酚

    1 mL混匀；再迅速滴加5 mL浓硫酸，振荡混匀，放置30 min，以蒸馏水作为空白对照，在波长400～800 nm范围内扫描，确定最大吸收波长。

    2.2.2葡萄糖标准曲线的制作精密吸取葡萄糖标准液各0.1，0.3，0.5，0.6，0.7，0.9，1.0 mL于试管中，加水稀释至1.0 mL，加入质量分数5%苯酚1 mL混匀；再迅速滴加5 mL浓硫酸，振荡混匀，放置30 min；以蒸馏水作为空白对照，490 nm

    波长处测定吸光度；以葡萄糖浓度C(mg·mL-1)为横坐标，吸光度值 A 为纵坐标，绘制标准曲线，得出标准曲线方程。`

    2.2.3巴戟天-杜仲多糖的含量测定精密称取样品多糖粉末0.01 g，于50 mL容量瓶中定容，摇匀；量取25 mL溶液置于50 mL容量瓶中，稀释至刻度，摇匀，制成供试液。取供试液1.0 mL，加入质量分数5%苯酚试剂1 mL混匀；再迅速滴加5 mL浓硫酸，比色测定出吸光度A，由标准曲线方程求出多糖提取液浓度C。

    2.3巴戟天-杜仲多糖干预软骨细胞活性研究

    2.3.1软骨细胞的分离和培养清洁级4周龄SD大鼠，脱颈处死，消毒双膝并离断，质量分数75 %

    酒精浸泡5 min ......