独活寄生汤含药血清对大鼠退变软骨细胞Bcl—2、Bax表达的影响(2)
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1 实验材料
1.1 实验药物 独活寄生汤由独活、桑寄生、牛膝、杜仲、秦艽、防风、肉桂、细辛、川芎、当归、芍药、干地黄、人参、茯苓、甘草组成，由福建中医药大学附属第二人民医院药剂科提供。
1.2 实验动物 健康2月龄清洁级SD大鼠36只(雌雄各半)，健康4周龄清洁级SD大鼠20只(雌雄不限)，由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供，实验动物合格证号：SCXK(沪)2007-0011。福建中医药大学实验动物中心提供清洁级医学实验动物环境设施，许可证号：SYXK(闽)2009-0001。
1.3 主要试剂 DMEM培养基(Hyclone公司)；胎牛血清(GIBCO公司)；质量分数0.25%胰蛋白酶(Hyclone公司)；TRIZOL试剂(美国Invitrogen公司)；逆转录试剂盒(Fermentas公司)；引物合成(上海生工生物工程公司)；Bax，Bcl-2和β-actin一抗(美国Santa Cruz Biotechnology公司)、二抗(美国Cell Signaling Technology公司)。
1.4 主要仪器 二氧化碳培养箱(Thermo公司)；荧光倒置相差显微镜(徕卡仪器公司)；PCR仪，蛋白核酸分析仪(美国Beckman Coulter公司)；化学发光成像系统ChemiDocXRS +(Bio-Rad公司)。
2 方 法
2.1 独活寄生汤含药血清的制备 健康2月龄清洁级SD大鼠36只，随机分为独活寄生汤组(含药血清组)27只和生理盐水对照组(空白血清组)9只。根据“人和动物间按体表面积折算的等效剂量比率表”换算[3] ......
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